人脂肪脫細胞基質(zhì)促進SD大鼠皮膚全層缺損創(chuàng)面愈合的研究.pdf

1、目的:通過系統(tǒng)化的方式將脂肪組織進行脫細胞處理,提取細胞外基質(zhì)成分,制備脫細胞基質(zhì)材料,通過組織學、細胞學及動物學檢查,證實人脂肪脫細胞基質(zhì)材料有利于促進體細胞及干細胞的粘附、增殖、遷移及干細胞的分化,有利于促進SD大鼠全層皮膚缺損的創(chuàng)面愈合,可作為理想的組織修復材料之一。
　　方法:通過乳糜化處理、胰酶消化、異丙醇萃取等相關(guān)處理進行脂肪組織脫細胞化,提取細胞外基質(zhì)成分,凍干制成脂肪脫細胞基質(zhì)材料。通過HE染色、DAPI染色、油紅

2、O染色、掃描電鏡觀察評價脫細胞基質(zhì)材料內(nèi)細胞及細胞成分清除情況。通過病理切片染色進行細胞外基質(zhì)主要成分膠原蛋白的定性檢測。通過體外條件下在脫細胞基質(zhì)材料上接種人臍靜脈內(nèi)皮細胞,觀察不同時間段人臍靜脈內(nèi)皮細胞與細胞基質(zhì)材料的粘附及增殖情況。通過誘導接種到脫細胞基質(zhì)材料上的人脂肪干細胞向脂肪細胞分化,觀察脫細胞基質(zhì)材料促進脂肪干細胞分化功能。建立SD大鼠全層皮膚缺損模型,設(shè)立自愈組、脂肪脫細胞基質(zhì)材料組、人脂肪干細胞組,比較不同組間創(chuàng)面愈合

3、時間及病理學改變,觀察脂肪脫細胞基質(zhì)材料在促進創(chuàng)面愈合的作用。
　　結(jié)果:通過乳糜化處理、胰酶消化、異丙醇萃取后制備的脂肪脫細胞基質(zhì)材料脫細胞徹底,無細胞及細胞成分殘留,細胞外基質(zhì)的主要成分膠原蛋白保存較好,具有適宜細胞良好生長的孔徑,有利于促進體細胞及干細胞的粘附、遷移、增殖及干細胞分化的能力,并具有促進血管內(nèi)皮細胞呈現(xiàn)“管腔”樣分布。脫細胞基質(zhì)材料能夠有效的促進SD大鼠全層皮膚缺損的創(chuàng)面愈合,并能較好的改善創(chuàng)面愈合的質(zhì)量。