人脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)促進(jìn)SD大鼠皮膚全層缺損創(chuàng)面愈合的研究.pdf

1、目的:通過(guò)系統(tǒng)化的方式將脂肪組織進(jìn)行脫細(xì)胞處理,提取細(xì)胞外基質(zhì)成分,制備脫細(xì)胞基質(zhì)材料,通過(guò)組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)及動(dòng)物學(xué)檢查,證實(shí)人脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料有利于促進(jìn)體細(xì)胞及干細(xì)胞的粘附、增殖、遷移及干細(xì)胞的分化,有利于促進(jìn)SD大鼠全層皮膚缺損的創(chuàng)面愈合,可作為理想的組織修復(fù)材料之一。
　　方法:通過(guò)乳糜化處理、胰酶消化、異丙醇萃取等相關(guān)處理進(jìn)行脂肪組織脫細(xì)胞化,提取細(xì)胞外基質(zhì)成分,凍干制成脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料。通過(guò)HE染色、DAPI染色、油紅

2、O染色、掃描電鏡觀察評(píng)價(jià)脫細(xì)胞基質(zhì)材料內(nèi)細(xì)胞及細(xì)胞成分清除情況。通過(guò)病理切片染色進(jìn)行細(xì)胞外基質(zhì)主要成分膠原蛋白的定性檢測(cè)。通過(guò)體外條件下在脫細(xì)胞基質(zhì)材料上接種人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,觀察不同時(shí)間段人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與細(xì)胞基質(zhì)材料的粘附及增殖情況。通過(guò)誘導(dǎo)接種到脫細(xì)胞基質(zhì)材料上的人脂肪干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化,觀察脫細(xì)胞基質(zhì)材料促進(jìn)脂肪干細(xì)胞分化功能。建立SD大鼠全層皮膚缺損模型,設(shè)立自愈組、脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料組、人脂肪干細(xì)胞組,比較不同組間創(chuàng)面愈合

3、時(shí)間及病理學(xué)改變,觀察脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料在促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用。
　　結(jié)果:通過(guò)乳糜化處理、胰酶消化、異丙醇萃取后制備的脂肪脫細(xì)胞基質(zhì)材料脫細(xì)胞徹底,無(wú)細(xì)胞及細(xì)胞成分殘留,細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分膠原蛋白保存較好,具有適宜細(xì)胞良好生長(zhǎng)的孔徑,有利于促進(jìn)體細(xì)胞及干細(xì)胞的粘附、遷移、增殖及干細(xì)胞分化的能力,并具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)“管腔”樣分布。脫細(xì)胞基質(zhì)材料能夠有效的促進(jìn)SD大鼠全層皮膚缺損的創(chuàng)面愈合,并能較好的改善創(chuàng)面愈合的質(zhì)量。