阿司匹林通過抑制樹突狀細胞成熟減輕心臟移植排斥反應.pdf

1、實驗一小鼠腹腔異位心臟移植動物模型的建立和觀察
　　目的：小鼠腹腔異位心臟移植動物模型的建立和觀察
　　方法：將近交系BALB/c小鼠作為供體，近交系C57小鼠作為受體。在全麻下摘取供體BALB/c小鼠的心臟移植到受體C57小鼠的腹腔。阻斷受體小鼠腹主動脈及下腔靜脈，將供心的主動脈和肺動脈分別與受體的腹主動脈和下腔靜脈作端側吻合。吻合完畢后先開放遠端，再開放近心端恢復下腔靜脈和腹主動脈的血流供應，壓迫止血。待供心復跳穩(wěn)定后關

2、閉腹腔。轉移至溫箱內至小鼠蘇醒正常活動。
　　結果：模型成功率90％。死亡原因主要為吻合口血栓形成5%，出血3%，感染2%
　　結論：小鼠的腹部心臟移植模型較之頸部心臟移植，有明顯優(yōu)勢。顯微手術操作技巧的熟練水平、麻醉的深淺程度、術后補液的多少、復溫的控制都是影響模型成功的主要因素。充分積累操作經(jīng)驗后，腹腔心臟移植模型手術成功率高，模型更為穩(wěn)定。
　　實驗二阿司匹林通過抑制DC細胞的成熟減輕心臟移植術后排斥反應的研究<

3、br>　　目的：研究阿司匹林通過抑制DC細胞的成熟減輕心臟移植術后排斥反應的作用及機制
　　背景：DC細胞作為專職抗原提呈細胞，既能啟動免疫反應也可誘導免疫耐受。成熟的DC細胞能夠呈遞特異性抗原，刺激效應T細胞的增殖分化，啟動免疫反應。未成熟的DC細胞有利于誘導特異性抗原低反應性及免疫耐受。與此同時，研究發(fā)現(xiàn)阿司匹林能夠通過阻斷NF-κ b信號通路從而抑制DC成熟。由此我們推測阿司匹林在小鼠心臟移植術后抗排斥中能夠通過抑制 DC成

4、熟起到治療效果。本次研究，我們將利用不具有阻斷NF-κ b信號通路功能的非甾體抗炎藥吲哚美辛作為對照，探究阿司匹林是否是通過阻止NF-κ b信號通路抑制DC成熟減輕心臟移植術后排斥反應。
　　方法：近交系BALB/c和C57小鼠分別作為供體和受體。實驗分為對照組；吲哚美辛處理組；阿司匹林處理組。對照組移植后不做任何處理組，吲哚美辛組移植后24小時內開始每日分兩次皮下注射1毫克/千克/天量的吲哚美辛，阿司匹林組移植術后24小時內開始

5、每日分兩次皮下注射200毫克/千克/天量的阿司匹林。每日觸摸心臟兩次，記錄各組移植術后心臟存活時間；在第5、7天取受體體內的供心作HE切片觀察各組移植術后排斥反應的分級程度；在第5、7天取受體的供心尖部做實時熒光定量PCR檢測Th1、Th2、Th17、Treg標志性轉錄因子T-bet、GATA-3、RORγ t、FOXP3的轉錄水平；在第7天取受體脾臟做流式細胞術檢測CD11c+DC細胞的表面共同刺激分子 CD40、CD86的表達情況及

6、CD4+CD25+FOXP3+Treg的數(shù)量比例。P＜0.05為結果有統(tǒng)計學意義。
　　結果：心臟移植術后使用阿司匹林的移植物存活時間明顯高于其他兩組，各組存活時間分別為對照組（7、7、7、9、9），吲哚美辛組（7、8、8、9、12），阿司匹林組（9、9、12、13、15）。術后第5天心尖部PCR各檢測指標轉錄水平分別為T-bet（阿司匹林組＜對照組＜吲哚美辛組），GATA-3（阿司匹林組＜對照組＜吲哚美辛組），RORγ t（吲哚

7、美辛組＜阿司匹林組＜對照組），F(xiàn)OXP3（對照組＜吲哚美辛組＜阿司匹林組）。術后第7天心尖部PCR各檢測指標轉錄水平分別為T-bet（阿司匹林組＜對照組＜吲哚美辛組），GATA-3（阿司匹林組＜對照組＜吲哚美辛組），RORγ t（阿司匹林組＜吲哚美辛組＜對照組），F(xiàn)OXP3（對照組＜吲哚美辛組＜阿司匹林組）。術后第七天的阿司匹林組的CD11c+DC細胞的表面共同刺激分子 CD40、CD86的表達較之對照組、吲哚美辛組明顯減少，而CD4+