阿司匹林通過(guò)抑制樹(shù)突狀細(xì)胞成熟減輕心臟移植排斥反應(yīng).pdf

1、實(shí)驗(yàn)一小鼠腹腔異位心臟移植動(dòng)物模型的建立和觀察
　　目的：小鼠腹腔異位心臟移植動(dòng)物模型的建立和觀察
　　方法：將近交系BALB/c小鼠作為供體，近交系C57小鼠作為受體。在全麻下摘取供體BALB/c小鼠的心臟移植到受體C57小鼠的腹腔。阻斷受體小鼠腹主動(dòng)脈及下腔靜脈，將供心的主動(dòng)脈和肺動(dòng)脈分別與受體的腹主動(dòng)脈和下腔靜脈作端側(cè)吻合。吻合完畢后先開(kāi)放遠(yuǎn)端，再開(kāi)放近心端恢復(fù)下腔靜脈和腹主動(dòng)脈的血流供應(yīng)，壓迫止血。待供心復(fù)跳穩(wěn)定后關(guān)

2、閉腹腔。轉(zhuǎn)移至溫箱內(nèi)至小鼠蘇醒正?；顒?dòng)。
　　結(jié)果：模型成功率90％。死亡原因主要為吻合口血栓形成5%，出血3%，感染2%
　　結(jié)論：小鼠的腹部心臟移植模型較之頸部心臟移植，有明顯優(yōu)勢(shì)。顯微手術(shù)操作技巧的熟練水平、麻醉的深淺程度、術(shù)后補(bǔ)液的多少、復(fù)溫的控制都是影響模型成功的主要因素。充分積累操作經(jīng)驗(yàn)后，腹腔心臟移植模型手術(shù)成功率高，模型更為穩(wěn)定。
　　實(shí)驗(yàn)二阿司匹林通過(guò)抑制DC細(xì)胞的成熟減輕心臟移植術(shù)后排斥反應(yīng)的研究<

3、br>　　目的：研究阿司匹林通過(guò)抑制DC細(xì)胞的成熟減輕心臟移植術(shù)后排斥反應(yīng)的作用及機(jī)制
　　背景：DC細(xì)胞作為專職抗原提呈細(xì)胞，既能啟動(dòng)免疫反應(yīng)也可誘導(dǎo)免疫耐受。成熟的DC細(xì)胞能夠呈遞特異性抗原，刺激效應(yīng)T細(xì)胞的增殖分化，啟動(dòng)免疫反應(yīng)。未成熟的DC細(xì)胞有利于誘導(dǎo)特異性抗原低反應(yīng)性及免疫耐受。與此同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)阿司匹林能夠通過(guò)阻斷NF-κ b信號(hào)通路從而抑制DC成熟。由此我們推測(cè)阿司匹林在小鼠心臟移植術(shù)后抗排斥中能夠通過(guò)抑制 DC成

4、熟起到治療效果。本次研究，我們將利用不具有阻斷NF-κ b信號(hào)通路功能的非甾體抗炎藥吲哚美辛作為對(duì)照，探究阿司匹林是否是通過(guò)阻止NF-κ b信號(hào)通路抑制DC成熟減輕心臟移植術(shù)后排斥反應(yīng)。
　　方法：近交系BALB/c和C57小鼠分別作為供體和受體。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組；吲哚美辛處理組；阿司匹林處理組。對(duì)照組移植后不做任何處理組，吲哚美辛組移植后24小時(shí)內(nèi)開(kāi)始每日分兩次皮下注射1毫克/千克/天量的吲哚美辛，阿司匹林組移植術(shù)后24小時(shí)內(nèi)開(kāi)始

5、每日分兩次皮下注射200毫克/千克/天量的阿司匹林。每日觸摸心臟兩次，記錄各組移植術(shù)后心臟存活時(shí)間；在第5、7天取受體體內(nèi)的供心作HE切片觀察各組移植術(shù)后排斥反應(yīng)的分級(jí)程度；在第5、7天取受體的供心尖部做實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Th1、Th2、Th17、Treg標(biāo)志性轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA-3、RORγ t、FOXP3的轉(zhuǎn)錄水平；在第7天取受體脾臟做流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD11c+DC細(xì)胞的表面共同刺激分子 CD40、CD86的表達(dá)情況及

6、CD4+CD25+FOXP3+Treg的數(shù)量比例。P＜0.05為結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：心臟移植術(shù)后使用阿司匹林的移植物存活時(shí)間明顯高于其他兩組，各組存活時(shí)間分別為對(duì)照組（7、7、7、9、9），吲哚美辛組（7、8、8、9、12），阿司匹林組（9、9、12、13、15）。術(shù)后第5天心尖部PCR各檢測(cè)指標(biāo)轉(zhuǎn)錄水平分別為T-bet（阿司匹林組＜對(duì)照組＜吲哚美辛組），GATA-3（阿司匹林組＜對(duì)照組＜吲哚美辛組），RORγ t（吲哚

7、美辛組＜阿司匹林組＜對(duì)照組），F(xiàn)OXP3（對(duì)照組＜吲哚美辛組＜阿司匹林組）。術(shù)后第7天心尖部PCR各檢測(cè)指標(biāo)轉(zhuǎn)錄水平分別為T-bet（阿司匹林組＜對(duì)照組＜吲哚美辛組），GATA-3（阿司匹林組＜對(duì)照組＜吲哚美辛組），RORγ t（阿司匹林組＜吲哚美辛組＜對(duì)照組），F(xiàn)OXP3（對(duì)照組＜吲哚美辛組＜阿司匹林組）。術(shù)后第七天的阿司匹林組的CD11c+DC細(xì)胞的表面共同刺激分子 CD40、CD86的表達(dá)較之對(duì)照組、吲哚美辛組明顯減少，而CD4+