手性元素修飾的聚酰胺介導(dǎo)原癌基因c-kit高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞凋亡.pdf

1、腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病之一，雖然傳統(tǒng)的手術(shù)療法、放療和化療取得了一定的進(jìn)展，但腫瘤患者的五年生存率仍然普遍偏低。靶標(biāo)治療現(xiàn)已成為當(dāng)今腫瘤研究的主要方向，而多靶點(diǎn)藥物在治療的同時(shí)也伴隨著強(qiáng)烈的副作用。尋找單靶點(diǎn)低毒高效的抗腫瘤藥物是非常必要的。原癌基因c-kit與腫瘤的關(guān)系非常密切，且高表達(dá)于某些腫瘤細(xì)胞中。聚酰胺分子在DNA小溝能特異性地對(duì)DNA堿基具有1∶1的識(shí)別作用，被認(rèn)為是目前對(duì)DNA堿基特異性識(shí)別能力最強(qiáng)、極有希望研發(fā)

2、成基因靶向藥物的合成小分子。
　　基于實(shí)驗(yàn)室原有的研究基礎(chǔ)，本論文設(shè)計(jì)了五種以c-kit基因?yàn)榘悬c(diǎn)的聚酰胺小分子;試圖探求這五種新的化合物對(duì)原癌基因c-kit高表達(dá)的幾種癌細(xì)胞的抑制作用。利用RT-PCR(Transcription PolymeraseChain Reaction)技術(shù)，篩選出了四種高表達(dá)c-kit基因的腫瘤細(xì)胞并作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的靶細(xì)胞。采用Native-PAGE(Native-Polyacylamide GelE

3、lectrophoresis)方法，考察了聚酰胺小分子與c-kit基因在體外基因水平上的相互作用;結(jié)果顯示，聚酰胺4和聚酰胺5與c-kit基因有明顯的結(jié)合，且聚酰胺5與c-kit基因的相互作用要強(qiáng)于聚酰胺4。RTCA(Real Time Cell Analysis)技術(shù)可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況，在體外細(xì)胞水平上，80μM聚酰胺4和20μM聚酰胺5可強(qiáng)烈的抑制BEL7402（肝癌）和MKN45（低分化胃癌）細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，通過體外細(xì)胞實(shí)

4、驗(yàn)還考察了實(shí)驗(yàn)室研究的另一類具有潛在抗腫瘤活性的萘酰亞胺分子的細(xì)胞毒性作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在A549（肺腺癌）和SGC7901（胃低分化腺癌）細(xì)胞中，1μM的聚酰胺5和20μM的三種萘酰亞胺分別單獨(dú)作用時(shí)對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制性非常弱;而當(dāng)1μM聚酰胺5和20μM萘酰亞胺或者0.1μg/mL抗c-kit單克隆抗體聯(lián)用時(shí)，細(xì)胞毒性作用明顯增強(qiáng)。其中，1μM聚酰胺5聯(lián)合20μM萘酰亞胺2對(duì)A549細(xì)胞的細(xì)胞毒性最強(qiáng)，而1μM聚酰胺5聯(lián)合抗c-kit單