S1P聯(lián)合大鼠骨骼肌成肌細胞對新生大鼠心肌細胞缺氧-復氧損傷的影響.pdf

1、目的：
　　 探討1-磷酸神經(jīng)鞘氨醇(S1P)聯(lián)合大鼠骨骼肌成肌細胞對新生大鼠心肌細胞缺氧/復氧后細胞損傷的影響。
　　 方法：
　　 1.分離新生1-3d的大鼠心室肌細胞、復蘇大鼠骨骼肌成肌細胞株，分別行新生大鼠心肌細胞原代培養(yǎng)(H組)、大鼠骨骼肌成肌細胞培養(yǎng)(L6組)及兩種細胞共同培養(yǎng)(H+L6組)，通過臺盼藍染色細胞計數(shù)法，繪制不同時間段細胞生長曲線，以觀察各組細胞生長情況。
　　 2.在新生大鼠心

2、肌細胞A/R損傷模型中，通過對心肌細胞復氧4h后即時(R4h)、1 d及2d的噻唑藍(MTT)檢測，探索各時間段S1P對新生大鼠心肌細胞缺氧/復氧作用的最佳濃度。
　　 3.以最佳濃度SIP加入共同培養(yǎng)細胞(S+H+L6組)，分別對H+L6組、S+H+L6組實施缺氧2h/復氧4h干預，通過比較兩組吸光值(OD值)、乳酸脫氫酶(LDH)及丙二醛(MDA)等指標在A/R各時間段差異，探討S1P聯(lián)合骨骼肌
　　 成肌細胞對新生

3、大鼠心肌細胞缺氧/復氧后細胞損傷的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.細胞培養(yǎng)結(jié)果：新生大鼠心肌細胞在培養(yǎng)24h后開始貼壁生長，培養(yǎng)6d內(nèi)細胞數(shù)量未見明顯變化，培養(yǎng)2d后可見細胞搏動；骨骼肌成肌細胞在培養(yǎng)6d內(nèi)細胞數(shù)增長明顯，未見細胞搏動；心肌細胞及骨骼肌成肌細胞在共同培養(yǎng)6d內(nèi)細胞總數(shù)增長較快，可見部分搏動細胞。
　　 2.S1P對心肌保護的有最佳濃度：在H組A/R損傷模型中，通過對活細胞數(shù)檢測顯示，與對照組相比(

4、H組中不加S1P)，實驗組(H組中加S1P)S1P為1μM濃度時，均可明顯減少各時間段(R4h、1d、2d)A/R對心肌細胞的損傷(P<0.05)。
　　 3.S1P聯(lián)合骨骼肌成肌細胞對A/R大鼠心肌細胞保護作用：對H+L6組、S+H+L6組實施A2h/R4h干預后，分別檢測兩組R4h、1d、2d時的OD值、LDH和MDA，結(jié)果顯示：S+H+L6組(S1P1μM)的OD值明顯高于H+L6組(P<0.05)，LDH和MDA含量要明