17β-雌二醇對缺氧損傷的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞表達(dá)HIF-1α的影響.pdf

1、目的：研究實驗性缺氧損傷的人視網(wǎng)膜色素上皮(human retinal pigmentepithelium,hRPE)細(xì)胞表達(dá)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)的變化情況及17β-雌二醇對其表達(dá)的影響。 方法：體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，隨機分為正常對照組、缺氧損傷組、17β-雌二醇預(yù)處理組和17β-雌二醇+它莫西芬預(yù)處理組。缺氧損傷組中分別加入50μmol/L

2、， 100μmol/L， 200μmol/L，和400μmol/L的氯化鈷作用4h，建立缺氧損傷模型；17β-雌二醇預(yù)處理組在細(xì)胞200μmol/L氯化鉆缺氧損傷前24h加入，依據(jù)濃度不同又分為三個亞組(10-4mol/L組，10-5mol/L組和10-6mol/L組)；17β-雌二醇+它莫西芬預(yù)處理組在200μmol/L氯化鈷細(xì)胞缺氧損傷前24h同時加入。采用免疫細(xì)胞化學(xué)法定性定量檢測HIF-1α蛋白的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT

3、-PCR)半定量檢測HIF-1αmRNA表達(dá)情況。 結(jié)果:(1)不同濃度的氯化鉆缺氧損傷4h可以引起hRPE細(xì)胞HIF-1αmRNA和蛋白表達(dá)的升高，并且隨著氯化鈷作用濃度的增加，HIF-1αmRNA和蛋白表達(dá)呈濃度依賴關(guān)系；(2)隨著17β-雌二醇濃度的增加，HIF-1αmRNA和蛋白的表達(dá)是遞減的(P<0.05)；(3)17β-雌二醇作用被其拈抗劑它莫西芬阻斷后，HIF-1α蛋白和mRNA表達(dá)與缺氧損傷組相比無明顯變化，差別