慢性乙型肝炎患者外周血Th17和Treg細(xì)胞及其表面CXCR3的表達(dá).pdf

1、背景和目的
　　中國約有9300萬慢性HBV感染者,其中慢性乙型肝炎患者約2000萬例。眾所周知,乙型肝炎病毒引起不同程度的肝細(xì)胞損傷,并不是因?yàn)椴《局苯託渭?xì)胞,而是由于病毒所誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)。其中,CD4+T淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生多種細(xì)胞因子,協(xié)助各特異性和非特異性效應(yīng)細(xì)胞殺滅病毒,因而成為細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)的重要組成部分。而IL-17+輔助性和Foxp3+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞是最近幾年研究得比較多的對慢性乙型肝炎有重要作用的新型CD4

2、+T淋巴細(xì)胞。已有研究顯示:循環(huán)中IL-17+T(一般指Th17細(xì)胞)細(xì)胞大量聚集在慢性乙型肝炎患者的肝臟中,且表達(dá)頻率隨著肝炎程度的加重而增加;而Foxp3+T(一般指Treg細(xì)胞)細(xì)胞的功能與Th17細(xì)胞相反,它可抑制HBV抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng),從而控制慢性乙型肝炎的進(jìn)展;Th17與Treg細(xì)胞之間的平衡對慢性乙型肝炎的免疫穩(wěn)態(tài)起著至關(guān)重要的作用。而CXCR3經(jīng)典地表達(dá)于激活的人類CD4+T淋巴細(xì)胞表面,介導(dǎo)效應(yīng)細(xì)胞趨化至外周炎癥部

3、位和淋巴結(jié),且CXCR3的表達(dá)及其趨化因子配體IP-10也被報(bào)道與慢性乙型肝炎相關(guān);但是,目前對CXCR3表達(dá)于Th17和Treg細(xì)胞表面的模式及其免疫調(diào)節(jié)作用卻知之甚少。因此,本論文研究CXCR3在健康者以及不同程度慢性乙型肝炎患者中CD4+IL-17+T以及CD4+CD25+Foxp3+T淋巴細(xì)胞表面的表達(dá)頻率,并初步探討CXCR3+Th17和Treg細(xì)胞與肝損害之間的關(guān)系。
　　方法
　　收集不同程度慢性乙型肝炎患者以

4、及健康者外周血2ml,排除其它原因引起的急慢性肝損傷,按照2000年中華醫(yī)學(xué)會(huì)慢性乙型肝炎分級(jí)指南,分為健康對照組、輕中度慢性肝炎組、慢性重型肝炎組,提取出各組外周血中單個(gè)核淋巴細(xì)胞;利用流式細(xì)胞術(shù),分別標(biāo)記上Th17和Treg細(xì)胞抗原特異性標(biāo)記抗體以及CXCR3單克隆抗體,后選用FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測Th17、Treg細(xì)胞的比例以及其表面CXCR3的表達(dá),FCS4軟件進(jìn)行分析;利用transwell技術(shù)分析IP-10對T

5、h17和Treg細(xì)胞的趨化作用;SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果
　　與正常對照組相比,各肝炎組的外周血中Th17和Treg細(xì)胞比例均有所增加,尤其是慢性重型肝炎組;而肝炎組的Th17細(xì)胞中CXCR3+細(xì)胞比例與健康組差異不大,但是肝炎組的Treg細(xì)胞中CXCR3+細(xì)胞比例較健康組明顯增加,尤見于慢性重型肝炎組;按照肝臟ALT水平進(jìn)行分級(jí),CXCR3+Th17和CXCR3+Treg細(xì)胞在不同級(jí)別組有明顯區(qū)別,肝臟

6、損傷越嚴(yán)重(ALT越高),CXCR3+Th17細(xì)胞和CXCR3+Treg細(xì)胞比例就越高;趨化因子IP-10濃度越大,受趨化的CXCR3+Th17和Treg細(xì)胞就會(huì)越多。
　　結(jié)論
　　慢性乙型肝炎患者外周血Th17和Treg細(xì)胞比例隨炎癥損傷程度的增加而增加;且這些免疫細(xì)胞表面CXCR3的表達(dá)在不同狀態(tài)下表達(dá)程度不一致,Th17細(xì)胞表面CXCR3的表達(dá)可以反映慢性肝炎時(shí)肝臟受損炎癥程度;配體IP-10可與CXCR3相互作用,