高同型半胱氨酸血癥促進(jìn)大鼠腹主動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄過程中尾加壓素II及其受體的表達(dá).pdf

1、背景與目的：經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)成形術(shù)(percutaneous transcoronary angioplasty,PTCA)和支架置入術(shù)是國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用的冠心病介入治療手段,但術(shù)后發(fā)生慢性再狹窄是其治療失敗的重要原因。研究表明,高同型半胱氨酸血癥(Hyperhomocysteinemia,HH)對(duì)大鼠腹主動(dòng)脈球囊損傷后內(nèi)膜增生有明顯促進(jìn)作用。作為一種新發(fā)現(xiàn)的血管活性肽尾加壓素II(urotensin II,UII),在促進(jìn)動(dòng)脈損傷術(shù)后內(nèi)

2、膜增生過程中的作用尚未清楚。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)HH大鼠腹主動(dòng)脈球囊損傷術(shù)后增生內(nèi)膜中的UII及其受體(urotensin II recptor,UT,或稱GPR14)的表達(dá),來了解UII/GPR14系統(tǒng)在HH促進(jìn)損傷動(dòng)脈內(nèi)膜增生過程中所起的作用。
　　材料和方法：200g Sprague Dawley雄性大鼠40只,隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組(C組),高蛋氨酸組(M組),腹主動(dòng)脈球囊損傷組(I組),腹主動(dòng)脈球囊損傷+高蛋氨酸組(MI組)。

3、所有動(dòng)物預(yù)飼養(yǎng)一周后,C組、I組予以正常飲食,M組、MI組給予L-蛋氨酸(1g/kg/d)灌胃。4周后利用球囊導(dǎo)管經(jīng)左頸動(dòng)脈至腹主動(dòng)脈行血管內(nèi)膜損傷。C組、M組單純予以分離左頸動(dòng)脈并結(jié)扎,不作腹主動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷,I組、MI組均予以腹動(dòng)脈球囊損傷。腹主動(dòng)脈球囊損傷模型制作成功后,C組、I組繼續(xù)予以正常飲食,M組、MI組仍予以L-蛋氨酸(1g/kg/d)灌胃,2周后處死所有實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物,利用酶聯(lián)免疫吸附法和放射免疫學(xué)方法分別檢測(cè)各組大鼠血漿

4、中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)和UII的含量,HE染色方法觀察各組大鼠腹主動(dòng)脈內(nèi)膜形態(tài)學(xué)變化,免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組大鼠腹主動(dòng)脈內(nèi)膜 UII、GPR14表達(dá)情況以及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)各組大鼠腹主動(dòng)脈GPR14mRNA表達(dá)。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x± s)表示,兩組間均數(shù)比較用T檢驗(yàn),多組間均數(shù)比較用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：L-蛋氨酸負(fù)荷灌胃形成

5、HH,MI組、M組血漿Hcy含量均明顯高于C組、I組;I組、MI組大鼠腹主動(dòng)脈球囊損傷后14天可見新生內(nèi)膜明顯增厚,其中MI組較I組明顯(P<0.01),而 C組、M組未見內(nèi)膜增生;免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)腹主動(dòng)脈內(nèi)膜 UII及GPR14蛋白表達(dá),其中UII在C組、M組內(nèi)膜少有表達(dá),在MI組與I組則可見呈強(qiáng)陽性表達(dá),且MI組明顯高于I組(P<0.01);而GPR14在四組血管平滑肌及內(nèi)膜中均有表達(dá),其中MI組增生內(nèi)膜表達(dá)較I組更明顯(P

6、<0.01);利用RT-PCR方法可見各組大鼠腹主動(dòng)脈均有GPR14 mRNA的表達(dá),MI、I組較C組、M組明顯(P<0.01), MI組與I組間的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而放射免疫學(xué)方法測(cè)定各組大鼠血漿UII的水平間差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：HH能夠加重動(dòng)脈球囊損傷大鼠內(nèi)膜增生程度,并促進(jìn)增生內(nèi)膜 UII及其受體GPR14蛋白及基因表達(dá)的增加,提示UII及其受體可能在HH促進(jìn)損傷血管內(nèi)膜增生過程