用基因芯片研究熱藥治療寒證的差異基因表達(dá)譜.pdf

1、目的:用基因芯片研究熱藥治療寒證的基因表達(dá)譜,分析寒證所涉及的相關(guān)基因類別,為評(píng)定寒證的分子療效,探索寒證的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ).方法:用39個(gè)因子的寒證量表,經(jīng)中醫(yī)診斷學(xué)教授把關(guān),精選典型寒證病例,對(duì)治療有明顯療效者,在治療前后分別采外周血,提取血液中的mRNA,再逆轉(zhuǎn)錄為cDNA以備檢測(cè).采用2035條人的靶基因cDNA制備成基因表達(dá)譜芯片,用Cy3和Cy5兩種熒光物質(zhì)分別標(biāo)記治療前與治療后cDNA,用其制備成探針,再進(jìn)行分子雜交,得到

2、治療前后的差異基因芯片表達(dá)譜,通過(guò)計(jì)算機(jī)掃描后獲得分子生物學(xué)信息,并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析.結(jié)果:經(jīng)熱藥治療后5例寒證患者有明顯的療效,初步篩選出了差異表達(dá)基因59條,其中熱藥治療后上調(diào)基因16條,熱藥治療后下調(diào)的基因43條,它涉及到病理性基因,及能量代謝、糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝、核酸代謝、免疫和內(nèi)分泌相關(guān)等7類基因,并舉例說(shuō)明.討論:該研究中經(jīng)熱藥治療后寒證癥狀改善明顯,基因表達(dá)有43條下調(diào),大多是一些病理性基因,上調(diào)的16條多為以正常代