柱層析法分離鱘魚膽汁的研究.pdf

1、湖北宜昌天峽鱘業(yè)有限公司是國(guó)內(nèi)外鱘魚品種最多、規(guī)模最大的種質(zhì)資源庫(kù)。本課題選用鱘魚膽汁作為研究對(duì)象，先采用薄層層析法對(duì)洗脫劑進(jìn)行篩選和優(yōu)化，再用硅膠柱層析法對(duì)鱘魚膽汁的有效成分進(jìn)行分離，比較了不同的洗脫劑體系、不同的硅膠粒徑和填料高度對(duì)分離效果的影響，并對(duì)分離物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析鑒定。 實(shí)驗(yàn)采用粒徑為0．125～0．180mm（80～120目）硅膠，依次用石油醚/乙酸乙酯體系（10：1，5：1，2：1，v/v）進(jìn)行梯度洗脫，分離效果

2、不太理想，只分離出單一的組分1，組分1、2在大部分流份中同時(shí)洗脫出來(lái)，未實(shí)現(xiàn)組分1、2的完全分離。 實(shí)驗(yàn)依次用氯仿、氯仿/乙醇（40：1，v/v）、氯仿/乙醇/1％醋酸（60：15：1，v/v/v）、氯仿/乙醇/1％醋酸（30：30：1，v/v/v）、丙酮/乙醇/水（2：1：1，v/v/v）作洗脫劑，可以分離出鱘魚膽汁中的6種主要組分。分別采用粒徑為0．125～0．180mm（80～120目）硅膠，填料高度為290mm和采用粒徑

3、為0．075～0．150mm（100～200目）硅膠，填料高度為500mm進(jìn)行兩次分離。由兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出，通過(guò)增加硅膠填料的高度，減小硅膠的粒徑，可以大大提高分離效果。 結(jié)合分離物的紫外可見(jiàn)光譜和紅外光譜，初步推斷組分1為游離型石膽酸，組分2可能為游離型鵝去氧膽酸或游離型膽酸，兩者在鱘魚膽汁均微量存在，總含量約5％；組分4為?；蛆Z去氧膽酸或牛磺膽酸，在鱘魚膽汁中以鈉（鉀）鹽的形式存在，在鱘魚膽汁中約占10％；組分5為甘氨鵝去氧