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文檔簡介
1、目的:
以apoE-/-基因敲除(apoE-KO)小鼠為研究對象,給予高脂飲食(HD)構(gòu)建動脈粥樣硬化模型,探討miR-20a對apoE-/-小鼠ABCA1的表達及其動脈粥樣硬化斑塊的影響。
方法:
1.30只6周齡的雄性apoE-/-小鼠給予高脂飲食(21%豬油+0.21%膽固醇)喂養(yǎng)10周后,隨機分為3組。
2.實驗分組:
①PBS組:小鼠腹腔注射10mg/k g的PBS液,共4周,
2、第一周注射兩次,以后三周每周注射一次;
?、趍iR-20a高表達組:小鼠腹腔注射miR-20a agomir10mg/kg(用DEPC水稀釋),共4周,注射方式同上;
?、踡iR-20a抑制組:小鼠腹腔注射miR-20a anta go mir10 mg/kg(用DEPC水稀釋),共4周,注射方式同上。檢測指標:
1.4周后,測各組小鼠血清HDL-C、LDL-C、TG、TC值。
2.Western b
3、lot測各組小鼠肝臟ABCA1蛋白表達。
3.Real-Time PCR測各組小鼠肝臟ABCA1mRNA的表達和miR-20a的含量。4.觀察各組小鼠主動脈根部動脈粥樣硬化斑塊。
結(jié)果:
1.與PBS組相比,miR-20a agomir干預后,小鼠血清HDL-C減少,LDL-C、TC增加,而 TG無顯著變化,肝臟 miR-20a表達增加,肝臟 ABCA1蛋白和ABCA1 mRN A表達減少,動脈粥樣硬化病變
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