胃腸道間質(zhì)瘤中E-cadherin、p16基因超甲基化和蛋白表達的研究.pdf

1、本文研究背景和目的：胃腸道間質(zhì)瘤(Gastrointestinal stromal tumors，GISTs)是胃腸道最常見的間葉源性腫瘤，具有不確定的惡性潛能，容易復發(fā)轉(zhuǎn)移。目前研究認為啟動子區(qū)超甲基化可能是腫瘤抑癌基因沉默的常見機制，并且能夠作為腫瘤診斷及預后的標記。本研究通過檢測CD117陽性GISTs中E-cadherin(CDH1)、p16基因啟動子區(qū)CpG島超甲基化狀況和蛋白表達情況分析它們的作用、意義。 研究方法：

2、收集2003～2006年56例GISTs手術(shù)切除標本，其中20例同時留取新鮮組織，經(jīng)常規(guī)HE，CD117、CD34、SMA、S-100免疫組化染色確定診斷：采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測GISTs石蠟包埋組織中E-cadherin和p16基因啟動子區(qū)超甲基化狀態(tài)；免疫組織化學方法檢測E-cadherin(E-cd)、p16蛋白的表達；并且應用Western-blot方法檢測20例新鮮GISTs組織中E-cd和Dysadherin蛋

3、白表達情況。應用SPSS 11.5軟件進行統(tǒng)計學分析。 研究結(jié)果： 1.56例胃腸道間質(zhì)瘤中E-cadherin基因超甲基化率為32％(18/56)，在極低、低、中、高度侵襲危險組中分別為9％(1/11)、2l％(4/19)、41.6％(5/12)、57％(8/14)；p16基因啟動子區(qū)超甲基化率34％(19/56)，在極低、低、中、高侵襲危險組中分別為0％(0/11)、16％(3/19)、50％(6/12)、71％(1

4、0/14)。統(tǒng)計分析表明，56例病例中E-cadherin和/或p16基因啟動子區(qū)超甲基化狀態(tài)(23/56，41％)與GISTs侵襲危險性分級及部位的差異具有顯著性(P<0.05)。 2.E-cadherin和/或p16基因超甲基化狀態(tài)與患者年齡、性別以及組織學類型的差異無顯著性(P>0.05)。 3.p16基因啟動子區(qū)超甲基化率34％(19/56)，免疫組化分析結(jié)果顯示，p16蛋白陽性細胞數(shù)小于50％病例占44.6％，

5、蛋白表達強度與GISTs侵襲危險性分級之間的差異具有顯著性(P<0.05)，p16基因CpG島超甲基化與蛋白表達相關(guān)，是GISTs發(fā)展的重要事件。 4.p16表達強度與GISTs組織學類型、部位、年齡、性別的差異無顯著性(P>0.05)。 5.Dysadherin在不同侵襲危險度級別GISTs中均有較高水平的表達，其表達量與GISTs危險度相關(guān)(P<0.05)。GISTs中僅有E-cd的微弱表達。 研究結(jié)論：

6、 1.E-cadherin和/或p16基因啟動子區(qū)超甲基化狀態(tài)與胃腸道間質(zhì)瘤侵襲危險度分級顯著相關(guān)，聯(lián)合檢測可能成為GISTs危險度評估的分子標記物，并將對該病的治療提供新的思路。 2.p16蛋白表達下調(diào)與GISTs危險程度有關(guān)(P<0.05)，表達量小于50％可作為揭示該腫瘤預后不良的指標。p16啟動子區(qū)超甲基化是蛋白表達下調(diào)的原因之一，免疫組化方法檢測其表達將成為揭示GISTs預后的可行方法。 3．GISTs中E