羅格列酮對(duì)血管再狹窄影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究.pdf

1、經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈成形術(shù)及支架置入術(shù)后的再狹窄率高達(dá)20-30％，嚴(yán)重影響其臨床療效，再狹窄已經(jīng)成為當(dāng)今世界上心血管病領(lǐng)域中的一個(gè)難題。以藥物洗脫支架為代表的新醫(yī)療器械的應(yīng)用，顯著降低了經(jīng)皮冠脈介入手術(shù)后再狹窄的發(fā)病率。然而其近期療效尚不完美，遠(yuǎn)期療效還有待考證。因此，人們把更多的注意力放到可以防止再狹窄的藥物治療上。用于預(yù)防或治療再狹窄的藥物或藥物洗脫支架主要是通過抑制再狹窄的三個(gè)重要環(huán)節(jié)來發(fā)揮作用，即血栓、炎癥、血管平滑肌細(xì)胞增殖。

2、 噻唑烷二酮類藥物(TZDs)是過氧化物酶體增殖物活化受體γ(PPARγ)的配體，近幾年研究表明，該類藥物除了增加胰島素敏感性以外，還具有抑制VSMCs增殖、遷移以及抗炎等作用。其對(duì)于血管內(nèi)皮功能的影響尚不明確，而且以上結(jié)果大多基于細(xì)胞、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究。 目的： 建立再狹窄動(dòng)物模型，結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)對(duì)服用羅格列酮后，血管內(nèi)皮功能、炎癥反應(yīng)、血管平滑肌細(xì)胞的增殖情況進(jìn)行了系統(tǒng)地觀察和研究。 方法：

3、 本研究的前兩部分為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。第一部分是利用PTCA球囊導(dǎo)管成功建立大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷模型，通過HE染色、彈力纖維染色觀察損傷血管不同時(shí)期的形態(tài)變化，并測(cè)定各層面積。第二部分在給予羅格列酮干預(yù)治療后，通過HE染色、彈力纖維染色觀察損傷血管的形態(tài)變化，測(cè)定各層面積；采用免疫組織化學(xué)法測(cè)定血管平滑肌細(xì)胞的增殖率及血管壁細(xì)胞中NF-κB的表達(dá)；采用Tunnel法測(cè)定血管平滑肌細(xì)胞的凋亡率。 本實(shí)驗(yàn)后兩部分為臨床研究。將觀察對(duì)象按

4、是否服用羅格列酮分為治療組及對(duì)照組，分別從外周靜脈在術(shù)前和術(shù)后1個(gè)月內(nèi)幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)取血標(biāo)本。第三部分觀察患者術(shù)后血炎癥因子水平的變化，了解羅格列酮對(duì)炎癥因子的影響。第四部分觀察患者術(shù)后血管內(nèi)皮活性物質(zhì)水平的變化，了解羅格列酮對(duì)內(nèi)皮系統(tǒng)合成、釋放血管內(nèi)皮活性物質(zhì)水平的影響。 結(jié)果： （一）大鼠頸總動(dòng)脈損傷血管再狹窄模型的建立 1.與未損傷側(cè)血管相比，損傷后7d新生內(nèi)膜已經(jīng)形成并增厚，可見較多的血管平滑肌細(xì)胞（VSMC

5、）增殖；損傷后14d VSMC的增殖減弱，細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）增加，內(nèi)膜繼續(xù)增厚；損傷后28d內(nèi)膜繼續(xù)增厚，管腔嚴(yán)重縮窄。 2.與未損傷側(cè)血管相比，損傷后7d新生內(nèi)膜面積明顯增大；14d-28d，新生內(nèi)膜面積繼續(xù)增大。而中膜面積無顯著變化。 （二）羅格列酮對(duì)大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響 1.經(jīng)羅格列酮治療后，新生內(nèi)膜面積顯著降低，管腔狹窄指數(shù)顯著降低。 2.經(jīng)羅格列酮治療后，平滑肌細(xì)胞

6、增殖率顯著降低，細(xì)胞凋亡率顯著升高，NF-κB的表達(dá)亦顯著降低。 （三）羅格列酮對(duì)冠心病合并糖尿病患者介入術(shù)后血炎癥因子水平的影響 1.MCP-1、ICAM-1兩指標(biāo)在治療組及對(duì)照組中，術(shù)后24h、術(shù)后7d與術(shù)前比較，均有顯著性差異；而兩指標(biāo)在兩組間同期比較，術(shù)后24h、術(shù)后7d均有顯著性差異。 2.CRP該指標(biāo)在治療組及對(duì)照組中，術(shù)后24h、術(shù)后7d、術(shù)后1m與術(shù)前比較，均有顯著性差異；該指標(biāo)在兩組間同期比較，

7、僅在術(shù)后24h有顯著性差異。IL-6該指標(biāo)在治療組及對(duì)照組中，術(shù)后24h、術(shù)后7d與術(shù)前比較，均有顯著性差異；該指標(biāo)在兩組間同期比較，在術(shù)后24h、術(shù)后7d均有顯著性差異。 （四）羅格列酮對(duì)冠心病合并糖尿病患者介入術(shù)后血管內(nèi)皮活性物質(zhì)水平的影響 NO、NOS、ET-1均在24小時(shí)、7天與組內(nèi)術(shù)前比較出現(xiàn)顯著性差異；在1個(gè)月時(shí)，僅治療組的NO、NOS與術(shù)前仍有顯著性差異；兩組間同期比較，NO、NOS、ET-1均在24小時(shí)、

8、7天有顯著性差異；NO、NOS在1個(gè)月時(shí)兩組間仍有顯著性差異。 結(jié)論： 1.利用PTCA球囊導(dǎo)管成功建立了大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷血管再狹窄模型，為再狹窄的研究提供了基礎(chǔ)。 2.血管內(nèi)皮損傷后，VSMC遷移、大量增殖，產(chǎn)生ECM，導(dǎo)致血管內(nèi)膜增生，是PTCA術(shù)后再狹窄的主要病理機(jī)制。 3.羅格列酮能明顯抑制球囊擴(kuò)張術(shù)后血管內(nèi)膜的增生。羅格列酮對(duì)血管內(nèi)膜的增生的抑制作用與該藥物干預(yù)細(xì)胞增殖周期、抑制VSMCs

9、增殖并促進(jìn)其凋亡有關(guān)，并和NF-κB的下調(diào)表達(dá)相關(guān)。 4.冠心病患者介入術(shù)后炎癥反應(yīng)激活主要發(fā)生在支架置入術(shù)后7天到1個(gè)月內(nèi)。主要是術(shù)中損傷、內(nèi)皮的修復(fù)以及支架置入導(dǎo)致的。內(nèi)皮修復(fù)完整后，炎癥逐漸消退。與對(duì)照組比較，羅格列酮可以顯著降低支架置入術(shù)后的血炎癥因子水平，抑制炎癥反應(yīng)。 5.冠心病患者介入術(shù)后，血管內(nèi)皮功能受損，主要發(fā)生在支架置入術(shù)后1個(gè)月內(nèi)。主要的表現(xiàn)是NO、NOS水平下降，ET-1水平升高。與對(duì)照組比較，羅