毛果楊銨轉(zhuǎn)運蛋白PtrAMT16功能鑒定和遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、氮素營養(yǎng)對于林木的生長至關(guān)重要，是有機體最主要的組成物質(zhì)之一，因此土壤中的氮素營養(yǎng)也成為林木生長發(fā)育的主要限制因素之一。同時由于糧食安全對國家繁榮與穩(wěn)定具有舉足輕重的地位，因此肥力較好的土壤一般用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，營造人工林往往選擇肥力相對較弱的區(qū)域，另外人工林也無法像農(nóng)作物一樣，進行定期施肥，因此提高林木在貧瘠土壤中的氮素吸收與利用效率，對促進林木在貧瘠土壤上的生長具有重要意義。
　　AMT是植物體內(nèi)銨吸收和轉(zhuǎn)移的重要的轉(zhuǎn)運子，主要從

2、事根部對于環(huán)境中銨的吸收和轉(zhuǎn)運以及地上部分銨的重吸收。本試驗對毛果楊銨轉(zhuǎn)運蛋白家族成員PtrAMT1;6基因進行了表達模式、功能鑒定和遺傳轉(zhuǎn)化等研究，結(jié)果如下:
　　(1)熒光定量PCR結(jié)果顯示:PtrAMT1;6基因偏好在葉片中表達，并且在成熟葉片中的表達顯著高于幼嫩葉片;對毛果楊PtrAMT1;6基因進行光周期定量，結(jié)果顯示，PtrAMT1;6基因具有黑暗誘導(dǎo)和光抑制的表達模式;
　　(2)酵母銨轉(zhuǎn)運蛋白突變體31019

3、b突變體功能恢復(fù)試驗結(jié)果表明，PtrAMT1;6基因恢復(fù)了突變體高親和力銨轉(zhuǎn)運的能力;
　　(3)用pCAMBIA-PtrAMT1;6P轉(zhuǎn)化擬南芥，并對轉(zhuǎn)化系進行GUS染色，試驗表明:轉(zhuǎn)化株的根莖連接部、子葉葉柄以及靠近葉柄的葉脈和葉肉可以被X-Gluc染成藍色，這表明PtrAMT1;6基因的啟動子具有啟動子活性;
　　(4)pROKE2-PtrAMT1;6轉(zhuǎn)化擬南芥并篩選純合子，通過幼苗在不同培養(yǎng)基上的生長試驗結(jié)果表明，P