2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討膽固醇結(jié)石和膽色素結(jié)石結(jié)中是否存在非粘性蛋白質(zhì)并鑒定蛋白質(zhì)的組成。
  方法:取30例經(jīng)保膽取石術(shù)的患者的膽囊結(jié)石,其中男11例,女19例。通過肉眼觀察和甘油三酯法測定膽固醇含量結(jié)合的方法對膽囊結(jié)石進行分類。將膽固醇含量≥70%歸為膽固醇型結(jié)石,將膽固醇含量≤30%歸為膽色素型結(jié)石,其中20例膽固醇型和10例膽色素型。應(yīng)用組織裂解法(RIPA)分別提取膽固醇結(jié)石和膽色素結(jié)石的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)變性后十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝

2、膠(SDS-PAGE)電泳分離膽固醇結(jié)石和膽色素型結(jié)石的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)經(jīng)考馬斯亮藍和銀染后切取蛋白質(zhì)條帶經(jīng)酶解脫鹽,然后利用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間串聯(lián)(MALDI-TOF-TOF)質(zhì)譜對這些蛋白進行鑒定。通過DAVID工具對上述基因進行基因本體(GO)功能富集分析及基因組百科全書(KEGG)信號轉(zhuǎn)導通路富集分析。選取 IGHG1、TRFE、SERPINA1蛋白質(zhì)利用western blot對蛋白質(zhì)進行驗證。
  結(jié)果:膽固醇

3、結(jié)石和膽色素結(jié)石中均出現(xiàn)了特異性蛋白質(zhì),由質(zhì)譜鑒定結(jié)果為轉(zhuǎn)鐵蛋白前體蛋白(TRFE)、白蛋白(ALB)、抗胰蛋白酶1(SERPINA1)、免疫球蛋白γ-1(IGHG1)、α血紅蛋白(HBA1)、β血紅蛋白(HBB),膽色素結(jié)石中不存在IGHG1。KEGG分析結(jié)果表明SERPINA1參與補體和凝血級聯(lián)反應(yīng),它不僅是一種代謝酶類抑制劑,同時其還參與先天免疫的調(diào)控。IGHG1、TRFE、SERPINA1蛋白質(zhì)在膽囊結(jié)石中的表達量增高。

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