表達Mn14-sod基因酵母工程菌的構建及其表達條件的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、超氧化物歧化酶(SOD)是一種金屬酶。根據(jù)其活性位點結合的金屬離子不同，SOD可分為CuZn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD以及最近發(fā)現(xiàn)的Ni-SOD和FeZn-SOD。由于SOD可以使超氧陰離子自由基歧化生成過氧化氫和分子氧，從而在防止氧化脅迫方面發(fā)揮重要作用。 蠟質芽孢桿菌M22菌株(M22)是本實驗室從植物體內分離的對多種植物病害有良好防治效果的生防細菌。前期研究發(fā)現(xiàn)其代謝液及胞內SOD含量較高，推測SOD可能在M22

2、定殖過程中以及在病害防治中發(fā)揮重要作用。 根據(jù)已克隆的M22菌株Mn14-SOD的基因序列，設計特異引物，擴增Mn14-sod基因的編碼框序列。將擴增產物插入到酵母分泌表達載體pPICZαA中，構建重組質粒pPICZαA-sodMn14，然后電激轉化酵母細胞。經ZeocinTM抗性篩選、PCR鑒定得到含Mn14-sod基因的陽性轉化子；當用PAGE電泳檢測它們的表達產物時，其中只有3株重組菌株PMSA、PMSB和PMSC的發(fā)酵上

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