NSAIDs對(duì)結(jié)直腸腫瘤的作用及信號(hào)傳導(dǎo)探討.pdf

1、四川大學(xué)博士后學(xué)位論文NSAIDs對(duì)結(jié)直腸腫瘤的作用及信號(hào)傳導(dǎo)探討姓名：王春暉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士后專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：歐陽(yáng)欽20031201四川大學(xué)博士后出站報(bào)告結(jié)果：( 1 ) a s p i r i n 、c e l e c o x i b 及m e l o x i c a m 均能有效抑制體外培養(yǎng)的H T - 2 9 、L S l 7 4 一T ( 均為C O X 一2 陽(yáng)性表達(dá)) 及S W 4 8 0 ( C O X 一2

2、陰性) 結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)，并具有良好的量一效關(guān)系，m e l o x i c a m 儀在l m M 終濃度有效。另外，a s p f f i n 及c e l e c o x i b下調(diào)H T - 2 9 細(xì)胞及S W 4 8 0 細(xì)胞P C N A 表達(dá)。( 2 ) l O m M 的a s p i r i n 及5 0 p M 的c e l e c o x i b能誘導(dǎo)H T - 2 9 及S W 4 8 0 細(xì)胞凋亡，對(duì)照組凋亡細(xì)

3、胞較少。流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞劇期，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組比較，a s p i r i n 及c e l e c o x i b 均能使進(jìn)入S 期的結(jié)腸癌細(xì)胞減少。( 3 ) D M H能誘發(fā)大鼠結(jié)直腸腺瘤及腺癌，2 2 周末，r o f e c o x i b 預(yù)防組( n ：6 ) 有3 只大鼠發(fā)生腺瘤( 5 0 ％) ，對(duì)照組( n = 6 ) 有6 只大鼠發(fā)生腺瘤( 1 0 0 ％) ；預(yù)防組及對(duì)照組大鼠平均每只腺瘤數(shù)分別為1 ．6 6 m

4、0 ，5 7 v s2 ．8 3 i l ．1 6 ，P < 0 ，0 5 ) 。2 4 周末，r o f e c o x i b 預(yù)防組( n = 6 ) 大鼠腺癌發(fā)生率均為5 0 ％，對(duì)照組( n = 6 ) 發(fā)生率為8 3 ．3 ％；預(yù)防組及對(duì)照組腺癌數(shù)分別為1 ．3 3 4 - 0 ．5 8Y S2 ．4 0 4 - 0 ．8 9 ，P < 0 ．0 5 ) 。大鼠結(jié)直腸腫瘤組織p E R K 水平較正常結(jié)腸組織明顯

5、升高，腺瘤和腺癌組織p E R K 的表達(dá)無(wú)明顯差異；r o f e c o x i b 明顯F 調(diào)結(jié)腸腫瘤組織p E R K 表達(dá)。( 4 ) 蛋白質(zhì)印跡發(fā)現(xiàn)， a s p i r i n 及c e l e c o x i b 能不唰程度下調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞C O X 一2 、p E R K 及N F —r ．B p 6 5 的表達(dá)水平，而對(duì)E R K 表達(dá)的影響不明顯。( 5 ) 凝膠遷移電泳分析表明，2 0 ％血清或T N F ．Ⅱ能刺

6、激A P 一1 及N F ．K B結(jié)合活力。a s p i r i n 、c e l e c o x i b 及m e l o x i c a m 均能抑制H T - 2 9 細(xì)胞A P ．1 及N F ．r d 3 活化：c e l e c o x i b 及m e l o x i c a m 均能抑制S W 4 8 0 細(xì)胞A P ．1 及N F —r ．B 活化，a s p i r i n 對(duì)S W 4 8 0 細(xì)胞N F —r

7、d 3 活性的影響不明顯。( 6 ) 三種結(jié)腸癌細(xì)胞均表達(dá)N A G ．1 基因m R N A ，其中L S l 7 4 - T 細(xì)胞N A G - 1 基礎(chǔ)水平較低；N S A I D s 能不同程度上調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞N A G ·l 基因表達(dá)。( 7 ) 成功構(gòu)建了N A G ．1 真核表達(dá)載體，經(jīng)測(cè)序分析該插入片段與G e n eB a n k 中N A G ．1 序列具有高度一致性。結(jié)論：( 1 ) C O X 一2 選擇

8、性及非選擇性抑制劑均能有效阻滯表達(dá)或不表達(dá)C O X 一2的結(jié)腸癌細(xì)胞株細(xì)胞周期進(jìn)程、抑制結(jié)腸癌的生長(zhǎng)。( 2 ) a s p i r i n 及c e l e C O X i b 能有效誘導(dǎo)C O X 一2 陽(yáng)性表達(dá)的H T - 2 9 及C O X ．2 陰性表達(dá)的S W 4 8 0 細(xì)胞凋亡。( 3 ) C O X 一2選擇性抑制劑r o f e c o x i b 不僅能預(yù)防化學(xué)致癌劑誘發(fā)大鼠結(jié)直腸腺瘤發(fā)生，還能減少腺癌發(fā)生；這