嚴重燙傷后大鼠小腸粘膜上皮細胞刷狀緣二肽轉運載體（PepT1）的攝取和轉運功能的變化.pdf

1、本文研究目的：為明確機體在嚴重創(chuàng)傷情況下小腸粘膜上皮細胞刷狀緣二肽轉運載體的功能變化規(guī)律，制作大鼠嚴重燙傷的在體模型，并利用此模型研究創(chuàng)傷后大鼠小腸粘膜上皮細胞刷狀緣二肽轉運載體的轉運和攝取功能的變化，進一步明確嚴重燙傷大鼠小腸上皮細胞損傷后二肽轉運載體功能。 研究方法：SD大鼠正常飼養(yǎng)1W后，背部剃毛。鹽酸氯氨酮腹腔麻醉后制成30％TBSAⅢ度燙傷模型，經病理檢測和大鼠小腸粘膜厚度、絨毛高度、隱窩深度及絨毛表面積等指標確定模型

2、的標準化。制作大鼠小腸的外翻小腸囊，將取下的腸段在Krebs液中輕輕清洗，擠出內容物，向下翻轉小腸段。腸段外翻后，先結扎腸囊的一端，然后用取樣器取0.2ml的Krebs液，沿漿膜壁慢慢注入到漿膜腔中，結扎另一端，外翻腸囊即制作完成。新制備的外翻腸囊用Krebs液清洗后放進盛有Krebs液的培養(yǎng)皿中。將制作完成的外翻腸囊浸入含二肽溶液(3H-Gly-Sar，10μCi)的三角燒瓶中，注入含95％O2、5％CO2的混合氣體后，蓋緊瓶蓋，置于

3、37℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱中孵育15min，振蕩速率為100r/min。孵育完成后取出腸囊，迅速用冰鹽水沖洗4遍，置冰板上剪開腸囊一端，倒出0.2ml的漿膜液。漿膜腔內用0.4ml的Krebs液輕輕沖洗2遍，得轉運液，共1.0ml；取腸囊中段腸片約0.5×0.5cm，稱重，經裂解液處理后即得攝取液。用此外翻小腸囊研究燙傷大鼠小腸上皮細胞刷狀緣二肽轉運載體對二肽的攝取和轉運功能。RT-PCR檢測不同情況下二肽轉運載體的表達水平。 研究結

4、果：燙傷后大鼠光鏡下小腸腸壁較對照組明顯變薄，絨毛變短，細胞腫脹脫落，粘膜腺體稀疏排列。圖像分析見創(chuàng)傷組大鼠小腸粘膜厚度、絨毛高度、隱窩深度及絨毛表面積均顯著低于對照組(P≤0.01)。燙傷后大鼠小腸粘膜上皮細胞刷狀緣二肽轉運載體的攝取功能和轉運功能均明顯下降(P≤0.05)；燙傷后大鼠小腸粘膜上皮細胞刷狀緣二肽轉運載體轉(PepT1)mRNA明顯下降。 研究結論：機體在嚴重創(chuàng)傷(大面積燙傷)時腸上皮細胞二肽轉運載體(PepT1

5、)的攝取和轉運功能有明顯的變化。研究顯示，燙傷大鼠腸系膜血管搏動明顯減弱，血管變細，血液流速減慢，腸管色澤明顯變淡，提示燙傷后胃腸道等內臟器官的血液供應減少；由于腸道粘膜上皮細胞絨毛的高度、隱窩深度及粘膜的厚度均較正常明顯下降，這從解剖結構上提示胃腸道的生物學功能將受到嚴重的影響。對腸上皮細胞二肽轉運載體(PepT1)的攝取和轉運功能的研究證實，嚴重創(chuàng)傷時二肽轉運載體的轉運和攝取功能均較正常時明顯下降，其功能下降的本質變化是PepT1m