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文檔簡介
1、目的:克隆并發(fā)現(xiàn)人心血管高表達miRNA,分析其表達譜并尋找其靶基因,探尋其可能參與的心血管生理病理過程。 方法:構(gòu)建人心臟和內(nèi)皮細(xì)胞的miRNA文庫,運用Northern Blot和實時熒光定量PCR檢測miRNA的表達譜。通過生物信息學(xué)以及分子生物學(xué)手段預(yù)測、分析新發(fā)現(xiàn)miRNA的來源和作用的靶基因。運用基因芯片檢測過表達新發(fā)現(xiàn)miRNA的Hela細(xì)胞并高通量分析該miRNA可能調(diào)控的基因。 結(jié)果:克隆到數(shù)百個心血管
2、表達的miRNA,首次在人的組織和細(xì)胞中克隆到mir-126并證實其高表達于內(nèi)皮和心肌細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)mir-126來源于egfl7基因的第7個內(nèi)含子中并能通過宿主mRNA前體的剪切形成。發(fā)現(xiàn)VEGF是mir-126的靶基因,并且mir-126在乳腺癌組織中表達下調(diào)。此外,mir-126能夠下調(diào)AKT2基因同時能夠激活TNFAIP3和CXCL11的表達。 結(jié)論:Mir-126是一個心血管系統(tǒng)高表達miRNA并且在調(diào)節(jié)心肌代謝和血管新生
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