革蘭陰性桿菌耐藥性及其產(chǎn)ESBLs基因型的研究.pdf

1、目的：調(diào)查蘭州大學(xué)第二醫(yī)院醫(yī)院感染革蘭陰性桿菌譜及其耐藥性，對經(jīng)確認(rèn)的產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(Extended-spectrumbeta-lactamases，ESBLs)菌株進(jìn)行耐藥基因分型。 方法：采用MicroScan-4和K-B法，對蘭州大學(xué)第二醫(yī)院2000年-2004年的院內(nèi)感染革蘭陰性桿菌進(jìn)行鑒定和藥物敏感試驗，檢測分離菌對16種抗生素的耐藥性，利用“whonet5.3”軟件對耐藥性結(jié)果進(jìn)行錄入及分析。通過表型初篩法(

2、K-B)、表型確認(rèn)法(K-B)、三維試驗確認(rèn)產(chǎn)ESBLs菌株，采用PCR對ESBLs基因進(jìn)行分型。 結(jié)果：1、蘭州大學(xué)第二醫(yī)院革蘭陰性桿菌所致醫(yī)院感染中，大腸埃希菌比例最高，占34％，陰溝腸桿菌、不動桿菌比例呈上升趨勢。細(xì)菌的耐藥率在逐年上升，其中陰溝腸桿菌和鮑曼不動桿菌，耐藥性高于其它革蘭陰性桿菌(p＜0.05)，對第三代頭孢菌素耐藥率分別達(dá)到60-80％、40-70％，對亞胺培南耐藥的菌株日益增多，甚至出現(xiàn)了“全耐藥”的鮑曼

3、不動桿菌。敏感性較高的抗生素有丁胺卡那、派拉西林/他唑巴坦、亞胺培南。 2、本院2005年5月～9月從醫(yī)院感染臨床標(biāo)本分離革蘭陰性桿菌175株中，檢出產(chǎn)ESBLs菌49株，分布于大腸埃氏希菌、克雷伯菌、陰溝腸桿菌、弗勞地枸椽桿菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌，其中，主要是陰溝腸桿菌(17/49)，其次是大腸埃氏希菌(15/49)。單種菌株產(chǎn)ESBLs率前三位是陰溝腸桿菌(17/30，56.6％)，大腸埃氏希菌(15/40，37.5

4、％)，肺炎克雷伯(6/24，25.0％)。各病區(qū)中神經(jīng)科產(chǎn)ESBLs分離率最高(32.7％)。 3、按照NCCLS/CLSI推薦的表型確證法檢測陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌等菌的ESBLs與三維法進(jìn)行比較，其準(zhǔn)確率低于50％。 4、本院2005年5月～9月從175株革蘭陰性桿菌中分離并確認(rèn)產(chǎn)ESBLs菌49株，質(zhì)粒DNA提取后經(jīng)PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物測序符合TEM、SHV、CTX-M耐藥基因型序列。PCR產(chǎn)物聚丙烯酰

5、胺凝膠電泳結(jié)果提示，34株出現(xiàn)TEM型陽性條帶，5株出現(xiàn)SHV型、16株出現(xiàn)CTX-M型陽性條帶，11株無條帶。 結(jié)論：1、本院院內(nèi)感染革蘭陰性桿菌對臨床常用抗生素均有較高的耐藥率，耐藥性逐年上升。 2、陰溝腸桿菌、大腸埃希菌是主要產(chǎn)ESBLs的革蘭陰性桿菌。神經(jīng)科是主要產(chǎn)ESBLs菌的病區(qū)。 3、臨床微生物實驗室采用三維法測定陰溝腸桿菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌ESBLs更準(zhǔn)確。 4、蘭州大學(xué)第二醫(yī)院