產(chǎn)質(zhì)粒介導(dǎo)AmpCβ-內(nèi)酰胺酶陰溝腸桿菌基因型及耐藥性研究.pdf

1、目的：了解醫(yī)院感染的陰溝腸桿菌產(chǎn)AmpC酶的發(fā)生情況、質(zhì)粒介導(dǎo)AmpC酶基因型的分布、分析陰溝腸桿菌產(chǎn)酶與不產(chǎn)酶的耐藥情況，進(jìn)行本課題的研究。給臨床防控感染、合理用抗生素提供科學(xué)依據(jù)。 方法：選取161株陰溝腸桿菌采用K-B法以頭孢西丁紙片初篩疑產(chǎn)AmpC酶菌株；對(duì)疑產(chǎn)株通過AmpC：酶提取物做頭孢西丁三維試驗(yàn)檢測(cè)AmpC酶：對(duì)產(chǎn)AmpC酶菌株的酶提取物進(jìn)行頭孢曲松三維試驗(yàn)檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)。使用B型質(zhì)粒小樣快

2、速提取試劑盒進(jìn)行質(zhì)粒的提取；采用提取出的質(zhì)粒作為PCR的模板進(jìn)行擴(kuò)增；采用瓊脂糖凝膠，電壓80V電泳30min后凝膠成像儀下分析基因型。采用紙片擴(kuò)散(K-B)法，按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLs)2005制定的標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行藥敏紙片的選擇和藥敏試驗(yàn)結(jié)果判讀：所有原始數(shù)據(jù)用WHO細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)提供WHONET5.4軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析：計(jì)數(shù)資料分析采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果：在所檢測(cè)的161株陰溝腸桿菌中，產(chǎn)AmpC酶

3、的陰溝腸桿菌共46株，總檢出率為28.6％，其中單產(chǎn)AmpC酶菌株38株，檢出率為23.6％，同時(shí)產(chǎn)AmpC酶和ESBLs菌株8株，檢出率為4.9％。對(duì)46株三維試驗(yàn)陽(yáng)性的陰溝腸桿菌進(jìn)行質(zhì)粒提取試驗(yàn)和5組質(zhì)粒介導(dǎo)AmpC酶的PCR檢測(cè)，共有15株為質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶，基因型為單產(chǎn)ACT-1型、單產(chǎn)DHA-1型和同時(shí)產(chǎn)ACI-1和DHA-1型；經(jīng)質(zhì)粒接合傳遞實(shí)驗(yàn)有12株傳遞成功。本研究發(fā)現(xiàn)檢測(cè)到的15株質(zhì)粒介導(dǎo)產(chǎn)AmpC酶陰溝腸桿菌，表

4、現(xiàn)了對(duì)頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦和亞胺培南較敏感，對(duì)所監(jiān)測(cè)的其它抗生素耐藥率較高；同產(chǎn)AmpC酶+ESBLs的陰溝腸桿菌只對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦和亞胺培南較敏感；x<'2>檢驗(yàn)顯示不產(chǎn)AmpC酶的菌株和產(chǎn)AmpC酶的菌株對(duì)所監(jiān)測(cè)大多數(shù)抗生素耐藥率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：三維試驗(yàn)可作為實(shí)驗(yàn)室用來(lái)鑒別常見臨床分離革蘭陰性桿菌耐藥株是否產(chǎn)AmpC酶、ESBLs的的篩選方法。感染產(chǎn)AmpC酶陰溝腸桿菌中以染色體介導(dǎo)為主，