Toll樣受體及其信號(hào)通路在角膜真菌感染中的作用.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文Toll樣受體及其信號(hào)通路在角膜真菌感染中的作用姓名：高建魯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：吳欣怡20060418Toll樣受體及其信號(hào)通路在角膜真菌感染中的作用博十研究生業(yè)眼科學(xué)師洲教授中文摘要第一部分：Toll樣受體在人眼角膜上皮細(xì)胞的表達(dá)和功能研究目的探討Toll樣受體(Tolllikereceptors，TLRs)1～TLR9在人眼角膜上皮及角膜上皮細(xì)胞系的表達(dá)及其功能。材料和方法用半定量RTPCR方

2、法檢測(cè)20例健康青年人角膜上皮組織標(biāo)本、水生化人眼角膜上皮細(xì)胞系(THCE)細(xì)胞及健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)的TLRI～TLR9mRNA表達(dá)；免疫印記(Westernblot)和免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)人角膜上皮組織和角膜上皮細(xì)胞系THCE的TLR2和TLR4蛋白質(zhì)表達(dá)及分布；用TLR3的配體聚肌胞苷酸(PolyI：C，100g／m1)和TLR4的配體綠膿桿菌脂多糖(LPS，100ng／m1)刺激THCE細(xì)胞，于刺激后lh，2h，

3、4h，8h分別收集細(xì)胞培養(yǎng)上清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)其IL8的變化。結(jié)合TLR4抗體封閉實(shí)驗(yàn)，研究TLRs在人眼角膜上皮細(xì)胞的表達(dá)及其功能。結(jié)果20例角膜上皮組織的RTPCR結(jié)果顯示：TLRl～TLR3，TLR5，TLR6及TLR9在人眼角膜上皮細(xì)胞為強(qiáng)表達(dá)，TLR7和TLR8弱表達(dá)，TLR4微弱表達(dá)。20例標(biāo)本中1例TLR3，TLR4，TLR6及TLR8為陰性表達(dá)，1例TLR5微弱表達(dá)。THCE細(xì)胞與人眼角膜上皮組織有