GluR5-KA受體對腦缺血復灌時Src介導的NMDA受體酪氨酸磷酸化的調控機制及其作用的研究.pdf

1、目的: 根據(jù)已有的報道，KA受體亞基GluR5、GluR6在癲癇的發(fā)病過程中起著相反的作用。我室前期結果顯示，GluR6介導的JNK的激活在腦缺血導致的興奮毒方面起著重要作用。由此，本文旨在探討GluR5的激活在腦缺血的過程中是否起著與GluR6相反的作用及其作用機制。 方法: 采用大鼠四動脈結扎全腦缺血模型，通過形態(tài)學方法觀察激活GluR5(用GluR5激動劑ATPA)對海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的保護作用。且運用免疫印跡、免疫沉淀、

2、免疫組化等方法，檢測在激活GluR5時，激酶Src、NMDA受體2A和2B亞基的酪氨酸磷酸化，及PSD95、Src、NR2A的結合狀態(tài)。應用GluR5的拮抗劑NS3763、反義寡核苷酸(AS-ODNs)、電壓門控鈣離子通道阻斷劑CdCl2和GABAA受體激動劑蠅蕈醇(muscimol)、拮抗劑荷包牡丹堿(Bicuculline)等工具藥以探討激活的GluR5對腦缺血保護作用的機制。 結果: 免疫印跡、免疫沉淀、免疫組化、焦油紫染

3、色的相關結果顯示： 1.ATPA可抑制海馬CA1區(qū)Src、NR2A和2B的酪氨酸磷酸化。 2.CdCl2能逆轉ATPA對Src、NR2A和2B的酪氨酸磷酸化的抑制作用。 3.GABAA受體介導了ATPA對Src、NMDA受體酪氨酸磷酸化的抑制作用。 4.GABAA受體激活能明顯抑制NMDA受體介導的全細胞電流。 5.GABAA受體介導了ATPA對PSD95、Src和NR2A結合的抑制作用。

4、 6.免疫組化的結果進一步揭示了激活GluR5-KA受體所涉及的相關機制。 7.組織學觀察表明，ATPA對缺血性腦損傷有保護作用。 結論: 在腦缺血復灌時，用低濃度(2nmol)ATPA激活GluR5可以抑制由Src介導的NMDA受體的酪氨酸磷酸化，降低NR2A、PSD95和Src的結合水平。且電壓門控鈣離子通道，GABAA受體參與了這個過程。提示激活GluR5所引起的保護作用可能是通過促進中間神經(jīng)元釋放GABA而實現(xiàn)的