蛇床子素逆轉(zhuǎn)人膀胱腫瘤T24-ADM細(xì)胞耐藥作用及其機(jī)制.pdf

1、[研究目的]
　　 化療是治療腫瘤最重要的手段之一，但腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性(MDR)是導(dǎo)致化療失敗的主要原因，也是影響臨床療效的關(guān)鍵因素。MDR的逆轉(zhuǎn)有著重要意義和臨床應(yīng)用價(jià)值。蛇床子素(OST)是從傳統(tǒng)的中藥蛇床子的果實(shí)中提取的香豆素類(lèi)衍生物，已有研究表明蛇床子素能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化并且可以促進(jìn)凋亡達(dá)到抑制增殖的作用。已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)鈣通道阻滯劑維拉帕米(VRP)具有逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性，能夠提高耐藥細(xì)胞中化療藥物的濃度。蛇床子素

2、同時(shí)具有類(lèi)似VRP的細(xì)胞膜鈣通道阻滯作用，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康难芯縊ST對(duì)T24/ADM細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)作用及探討其機(jī)制。
　　 [方法]
　　 1.采用MTT實(shí)驗(yàn)篩選OST對(duì)T24/ADM細(xì)胞無(wú)毒或低毒濃度，以篩選出的濃度作為耐藥逆轉(zhuǎn)的實(shí)驗(yàn)濃度。
　　 2.利用MTT實(shí)驗(yàn)分析阿霉素(adriamycin，ADM)、環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）及順鉑(cisplatin，DDP)對(duì)細(xì)胞株T24和T24/A

3、DM的半數(shù)抑制濃度IC50，證明T24/ADM細(xì)胞具有多藥耐藥性。
　　 3.分別利用MTT實(shí)驗(yàn)分析加入OST后，ADM、CTX和DDP對(duì)T24/ADM的半數(shù)抑制濃度IC50，觀察其逆轉(zhuǎn)效果，
　　 4.用流式細(xì)胞儀測(cè)定OST對(duì)T24/ADM細(xì)胞內(nèi)P-gp表達(dá)的影響。
　　 [結(jié)果]
　　 1.濃度17μmol/LOST對(duì)T24/ADM無(wú)明顯細(xì)胞毒性。
　　 2.T24/ADM對(duì)ADM、CTX和D

4、DP均有不同程度的耐藥，耐藥倍數(shù)分別為5.06、1.84、6.04。
　　 3.加入17μmol/LOST處理后T24/ADM對(duì)上述ADM、CTX和DDP的敏感性均有不同程度的提高，ADM對(duì)耐藥細(xì)胞株的IC50由(10.590±0.615)μg/ml降至(3.810±0.663)μg/ml，逆轉(zhuǎn)指數(shù)為2.77;CTX對(duì)耐藥細(xì)胞株的IC50由(3.667±0.945)μg/ml降至(2.973±0.27l)μg/ml，逆轉(zhuǎn)指數(shù)為1

5、.23;DDP對(duì)耐藥細(xì)胞株的IC50由(12.567±0.142)μg/ml降至(3.753±0.585)μg/ml，逆轉(zhuǎn)指數(shù)為3.35。
　　 4.17μmol/LOST干預(yù)后T24/ADM細(xì)胞內(nèi)P-gp蛋白表達(dá)明顯下降，與干預(yù)前T24/ADM細(xì)胞內(nèi)P-gp蛋白表達(dá)相比，下降了13.4％(p＜0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 蛇床子素具有逆轉(zhuǎn)T24/ADM細(xì)胞多藥耐藥性的活性，機(jī)制與OST抑制T24/ADM細(xì)