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文檔簡介
1、[研究目的]
化療是治療腫瘤最重要的手段之一,但腫瘤細胞多藥耐藥性(MDR)是導致化療失敗的主要原因,也是影響臨床療效的關鍵因素。MDR的逆轉有著重要意義和臨床應用價值。蛇床子素(OST)是從傳統(tǒng)的中藥蛇床子的果實中提取的香豆素類衍生物,已有研究表明蛇床子素能夠誘導腫瘤細胞分化并且可以促進凋亡達到抑制增殖的作用。已有實驗證實鈣通道阻滯劑維拉帕米(VRP)具有逆轉腫瘤細胞多藥耐藥性,能夠提高耐藥細胞中化療藥物的濃度。蛇床子素
2、同時具有類似VRP的細胞膜鈣通道阻滯作用,本實驗目的研究OST對T24/ADM細胞的逆轉作用及探討其機制。
[方法]
1.采用MTT實驗篩選OST對T24/ADM細胞無毒或低毒濃度,以篩選出的濃度作為耐藥逆轉的實驗濃度。
2.利用MTT實驗分析阿霉素(adriamycin,ADM)、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)及順鉑(cisplatin,DDP)對細胞株T24和T24/A
3、DM的半數抑制濃度IC50,證明T24/ADM細胞具有多藥耐藥性。
3.分別利用MTT實驗分析加入OST后,ADM、CTX和DDP對T24/ADM的半數抑制濃度IC50,觀察其逆轉效果,
4.用流式細胞儀測定OST對T24/ADM細胞內P-gp表達的影響。
[結果]
1.濃度17μmol/LOST對T24/ADM無明顯細胞毒性。
2.T24/ADM對ADM、CTX和D
4、DP均有不同程度的耐藥,耐藥倍數分別為5.06、1.84、6.04。
3.加入17μmol/LOST處理后T24/ADM對上述ADM、CTX和DDP的敏感性均有不同程度的提高,ADM對耐藥細胞株的IC50由(10.590±0.615)μg/ml降至(3.810±0.663)μg/ml,逆轉指數為2.77;CTX對耐藥細胞株的IC50由(3.667±0.945)μg/ml降至(2.973±0.27l)μg/ml,逆轉指數為1
5、.23;DDP對耐藥細胞株的IC50由(12.567±0.142)μg/ml降至(3.753±0.585)μg/ml,逆轉指數為3.35。
4.17μmol/LOST干預后T24/ADM細胞內P-gp蛋白表達明顯下降,與干預前T24/ADM細胞內P-gp蛋白表達相比,下降了13.4%(p<0.05)。
[結論]
蛇床子素具有逆轉T24/ADM細胞多藥耐藥性的活性,機制與OST抑制T24/ADM細
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