木黃酮對人膀胱腫瘤T24-ADM細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、膀胱腫瘤是泌尿生殖系最常見的惡性腫瘤。目前膀胱腫瘤的治療仍以手術(shù)、化療、放療及免疫輔助治療為主。術(shù)后用藥物進(jìn)行膀胱內(nèi)灌注是治療膀胱腫瘤的重要手段,但仍有40％～80％的復(fù)發(fā)率,腫瘤細(xì)胞多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)是導(dǎo)致腫瘤治療失敗而復(fù)發(fā)的主要原因,有資料表明,90％以上腫瘤患者的死因與MDR有關(guān),因此如何治療MDR是一個(gè)亟待解決的問題。 近年來,建立一種MDR模型并尋找新的治療多藥耐藥的藥物顯的更

2、加迫切,木黃酮(genistein)是一種植物雌激素,多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究表明木黃酮可明顯降低乳腺癌、前列腺癌和卵巢癌等多種腫瘤的發(fā)生率。最近研究發(fā)現(xiàn)它亦有逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥,增強(qiáng)化療藥物的殺傷作用,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,從而提高腫瘤化療療效。為此,我們將研究木黃酮對人膀胱腫瘤多藥耐藥細(xì)胞增殖的影響,同時(shí)初步探討其作用機(jī)制。 第一部分：膀胱腫瘤T24細(xì)胞多藥耐藥模型的建立及耐藥特性鑒定 目的：建立膀胱腫瘤T24細(xì)胞多藥耐藥模型并鑒定其耐藥

3、特性。 方法：以膀胱腫瘤T24細(xì)胞為親本細(xì)胞,采用阿霉素(adriamycin,ADM)濃度梯度遞增法誘導(dǎo)細(xì)胞耐藥。光鏡觀察新建細(xì)胞系的形態(tài)學(xué)特點(diǎn),MTT法檢測細(xì)胞對藥物的敏感性,RT-PCR檢測。MDR1的mRNA。 結(jié)論：新建細(xì)胞系T24/ADM具有多藥耐藥特性,其耐藥機(jī)制主要與MDR1基因產(chǎn)物P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的過度表達(dá)有關(guān),達(dá)到下一步研究耐藥實(shí)驗(yàn)的要求。 第二部分：木黃酮對

4、膀胱腫瘤多藥耐藥T24細(xì)胞增殖的影響 目的：研究木黃酮對T24/ADM細(xì)胞增殖的影響。 方法：用木黃酮作用于T24/ADM細(xì)胞,采用MTT法檢測不同濃度木黃酮對T24/ADM細(xì)胞的抑制率,確定半數(shù)抑制濃度(IC50),并進(jìn)一步探討此濃度木黃酮、0.5μg/mlADM以及兩者聯(lián)合作用于T24/ADM細(xì)胞時(shí),對此細(xì)胞的抑制率。 結(jié)論：木黃酮作用于T24/ADM細(xì)胞,可抑制T24/ADM細(xì)胞增殖。推測其作用機(jī)制為：抑制