2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:分離培養(yǎng)人表皮干細(xì)胞(epidermal stem cells ESCs)并研究觀察其對(duì)裸鼠(BALB/c mice)全層皮膚缺損再上皮化的作用。 方法:1、人ESCs的分離培養(yǎng)和生物學(xué)特性的檢測(cè):用“Ⅳ型膠原粘附法”分離培養(yǎng)人ESCs后,應(yīng)用倒置相差顯微鏡觀察其細(xì)胞形態(tài),用細(xì)胞免疫化學(xué)染色、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。2、人表皮干細(xì)胞對(duì)裸鼠全層皮膚缺損再上皮化的實(shí)驗(yàn)研究:將培養(yǎng)獲得的人ESCs用DAPI標(biāo)記后,制備成細(xì)胞懸液

2、注射于12只裸鼠背部的全層皮膚缺損創(chuàng)面,通過(guò)對(duì)創(chuàng)面愈合過(guò)程的大體病理HE染色觀察、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole DAPI)熒光染色和免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)裸鼠創(chuàng)面組織內(nèi)人ESCs,研究ESCs對(duì)創(chuàng)面再上皮化的作用。 結(jié)果:1、用“Ⅳ型膠原粘附法”獲得的細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),分離孵育培養(yǎng)過(guò)夜后,細(xì)胞逐漸伸展形成鋪路石樣,細(xì)胞核較大,核漿比例大,大多相互聚集克隆生長(zhǎng)形成細(xì)胞集落;細(xì)

3、胞化學(xué)染色顯示CK14、CK19、β1整合素呈陽(yáng)性表達(dá),CK10呈陰性表達(dá);細(xì)胞周期分析ESCs處于G1期與S期的細(xì)胞比例之和為83.04%。其生物學(xué)特性符合表皮干細(xì)胞的特征。2、人ESCs對(duì)裸鼠全層皮膚缺損再上皮化作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:ESCs組12只裸鼠傷后3d的創(chuàng)面愈合率為48.72±12.88%,與空白對(duì)照組12只裸鼠傷后3d創(chuàng)面愈合率31.55±14.72%相比,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;ESCs組在傷后7d的創(chuàng)面愈合率為

4、95.11±6.11%,與空白對(duì)照組7d的創(chuàng)面愈合率78.33±10.17%相比,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組裸鼠傷后10天背部皮膚缺損創(chuàng)面全部愈合。DAPI熒光檢測(cè)顯示創(chuàng)面表皮層和真皮層有藍(lán)色熒光陽(yáng)性表達(dá);空白對(duì)照組創(chuàng)面組織未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)。免疫組織化學(xué)染色顯示ESCs組的創(chuàng)面CK10、CK14呈陽(yáng)性表達(dá);空白對(duì)照組創(chuàng)面組織未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)。ESCs組創(chuàng)面表皮層PCNA免疫組織化學(xué)染色為陽(yáng)性(++)表達(dá);空白對(duì)照組的為弱陽(yáng)性(+)表達(dá)

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