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1、目的:本文通過觀察大鼠不同心功能狀態(tài)心臟脂肪酸結(jié)合蛋白(heart—type fatty acid-binding protein,H-FABP)及腦鈉鈦(B-typenatriuretic peptide,BNP)含量的變化,探討二者在慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)中的臨床價(jià)值及與中醫(yī)心陽(yáng)虛的關(guān)系。方法:無(wú)特殊病原體(SPF)普通級(jí)雄性Wistar大鼠40只,體重200±20g,將其隨機(jī)分為四組:生
2、理鹽水對(duì)照組10只,心力衰竭模型組2周組、4周組、及8周組各10只。1.建立CHF模型:取健康雄性Wistar大鼠30只,體重200±20g,隨機(jī)分成三組,用1%的戊巴比妥鈉20~25mg/kg給予大鼠腹腔注射麻醉,按85mg/kg皮下注射異丙基腎上腺素(isoprotereno,ISO),24h后重復(fù)1次。分別在用藥后2周、4周、8周行心功能檢測(cè)。2.正常對(duì)照組:取健康雄性Wistar大鼠10只,體重200±20g,用1%的戊巴比妥鈉
3、20~25mg/kg給予大鼠腹腔注射麻醉,皮下注射生理鹽水0.25ml,24h后重復(fù)1次。3.模型鑒定:(1)心功能檢測(cè):分別于第二周末、四周末及第八周末對(duì)模型組進(jìn)行心功能檢測(cè):經(jīng)頸總動(dòng)脈測(cè)量左室收縮壓(Left ventricularsystolic pressure,LVSP),左室舒張末壓(Left ventricular end-diastolicpressure,LVEDP)及左室壓力最大上升及下降速度(~Left ventr
4、iculardeveloped pressure,±LVdp/dt).(2)HFABP及BNP測(cè)定:采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血漿HFABP及BNP含量。(3)病理學(xué)切片檢測(cè):左心室心肌組織常規(guī)石蠟包埋切片,HE染色觀察。(4)左室質(zhì)量指數(shù)(left ventricular weight mass index,VWI)(Vw/Bw)及肺、肝質(zhì)量指數(shù)測(cè)定。(5)數(shù)據(jù)分析:采用SPSS13.0軟件分析系統(tǒng)對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。所有指標(biāo)均用均值±標(biāo)準(zhǔn)差
5、((x)±s)表示,組間比較用單因素方差分析,P<0.05,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.大鼠一般情況及死亡率:CHF模型組大鼠2周組死亡2只,4周組死亡2只,8周組死亡2只,死亡率為20%。死亡因?yàn)榭赡苁菒盒孕穆墒С;虺溲孕牧λソ?而NS組無(wú)一例死亡,組間率比較P<0.05。CHF模型組與NS組癥狀有明顯差異,CHF組大鼠較NS組精神疲乏,畏寒,皮毛光澤度差,毛色暗黃口紫紺,部分呼吸有氣喘,飲食量及活動(dòng)量減少,尿少。體重增加緩慢,足
6、爪水腫,抓取反應(yīng)差,符合中醫(yī)心陽(yáng)氣虛型。2.大鼠心肌病理學(xué)改變:心臟標(biāo)本觀察:ISO組心臟表面黯淡,顏色暗紫; NS組心臟表面光滑,顏色紅潤(rùn),無(wú)炎癥病灶。HE染色結(jié)果顯示CHF組心肌組織受損:(1)心肌纖維排列紊亂,出現(xiàn)肥大、變性、壞死,部分肌原纖維溶解或斷裂。(2)心肌間質(zhì)充血、水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)、結(jié)締組織增生;(3)成纖維細(xì)胞增生和心肌間質(zhì)纖維化。隨著心室重構(gòu)的進(jìn)行,上述病變程度加重。NS組心肌纖維排列整齊,胞核清晰,細(xì)胞間隙正常,無(wú)
7、心肌纖維的破壞。3.大鼠血流動(dòng)力學(xué)測(cè)定:CHF2周組與NS組之間比較,P>0.05,兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異:CHF模型4周及8周組與NS組之間比較,CHF模型組間兩兩比較,LVSP、±LVdp/dtmax均明顯下降(P<0.01),LVEDP升高(P<0.01),兩兩相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.大鼠左室/體重、肺臟/體重、肝臟/體重比值:與NS組相比,CHF模型組上述重量指數(shù)顯著增加,其中CHF模型4周組及8周組與NS組比較(P<0.01),有統(tǒng)計(jì)
8、學(xué)差異;而模型組CHF模型2周組與NS組比較(P>0.05),沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。5.大鼠血漿BNP含量:BNP隨著心功能程度的加重而逐漸升高,NS組與CHF組2周組之間,CHF組2周組及4周組之間兩兩比較,P均<0.05,NS組與CHF組4周組、8周組之間兩兩比較,P<0.01,三者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。6.大鼠血漿HFABP含量:HFABP隨著心功能程度的加重而逐漸升高,CHF組與NS組,CHF模型組間兩兩比較,HFABP均增高(P<0.0
9、1),組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:1.BNP血漿濃度隨心功能衰竭(CHF)加重而逐漸增加,血漿BNP含量與心功能(+LVdp/dtmax)呈負(fù)相關(guān),r=-0.855。2.HFABP血漿濃度隨心功能衰竭(CHF)加重而逐漸增加,血漿HFABP含量與心功能(+LVdp/dtmax)呈負(fù)相關(guān),r=-0.893。3.從正常組到心衰組,從CHF模型2周組到8周組,血漿HFABP水平與BNP水平呈正相關(guān),r=0.914。4.從模型組可以看出,心肌纖
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