腺嘌呤所致大鼠慢性腎功能衰竭的機理研究.pdf

1、研究背景：慢性腎功能衰竭（chronic renal failure,CRF）是各種腎臟疾病持續(xù)進展的最終結局，嚴重威脅患者的生命，其主要病理學特征為慢性腎間質纖維化。制作符合人類CRF的動物模型，對研究CRF的發(fā)病機理，探討組織形態(tài)的變化與生化指標及臨床表現(xiàn)的相互關系，篩選有效藥物（特別是中草藥），闡明療效機制均有重要意義。
　　目的：通過動物實驗動態(tài)觀察TGF-β1、TSP-1及VEGF在腺嘌呤所致大鼠腎小管間質纖維化過程中的

2、變化，探討腺嘌呤所致大鼠慢性腎功能衰竭的機理。
　　方法：隨機將60只雄性清潔SD大鼠分為2組：模型組，2％的淀粉溶液將腺嘌呤配成2.5%腺嘌呤懸混液，按250 mg·kg-1·d–1清晨灌胃；正常對照組，給相同體積2%的淀粉溶液按上述時間清晨灌胃。2組分別于7天、14天、21天留取尿標本后，各處死大鼠10只，取血、腎臟標本，測定體重（BW）、24小時尿蛋白定量（24hU-TP）、尿 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖酐酶（NAG）、腎

3、重指數(shù)（腎臟重量/體重）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血白蛋白（ALB）；HE和Masson染色觀察腎小管－間質病理形態(tài)學改變；免疫組織化學染色檢測TGF-β1、TSP-1、VEGF在腎臟組織中的表達。
　　結果：1實驗前后各組大鼠尿量、BW、24hU-TP、尿NAG酶、腎重指數(shù)、Scr、BUN和 ALB的變化：第7天時模型組大鼠與同時相點正常對照組相比， BW、24hU-TP、尿 NAG酶、尿肌酐、腎重指數(shù)、Scr和 B

4、UN均明顯升高（P﹤0.01/ P﹤0.05），ALB無明顯變化；第14天時模型組大鼠與前一時相點自身對照（第7天時模型組大鼠）比較，BW、24hU-TP、尿 NAG酶、尿肌酐、腎重指數(shù)、Scr和BUN進一步升高（P﹤0.01），血 ALB與同組前一時相點比較有明顯降低；第21天時模型組大鼠與第14天時模型組大鼠比較，BW、24hU-TP、尿NAG酶、尿肌酐、腎重指數(shù)、Scr和 BUN繼續(xù)升高（P﹤0.01），血 ALB與同組前一時相點

5、比較顯著降低（P﹤0.01）。
　　結果2各組腎組織病理形態(tài)學變化：對照組腎小管間質基本正常。7天時模型組腎小管擴張，間質單核細胞浸潤、水腫，可見間質纖維組織灶性增生；14天時，腎小管擴張明顯，腎小管上皮空泡或顆粒性變性，基底膜斷裂，小管間質區(qū)域增寬，纖維化明顯；21天時，可見腎小管明顯萎縮及消失，間質廣泛纖維化。與正常對照組相比，7天時模型組大鼠TGF-β1、TSP-1明顯增強；14天時模型組大鼠與前一時相點自身對照（7天時模型

6、組大鼠）比較，TGF-β1、TSP-1表達進一步升高（P﹤0.01）；21天時模型組大鼠和第14天時模型組大鼠比較，TGF-β1、TSP-1繼續(xù)升高（P﹤0.01）。VEGF在正常對照組大鼠表達明顯，在7天時模型組大鼠VEGF表達可見明顯降低（P﹤0.01），14天時模型組表達繼續(xù)降低（P﹤0.01），21天時表達下降明顯（P﹤0.01）。
　　結論：1 TGF-β1在正常腎間質無表達；隨著腎間質病理損傷程度加重， TGF-β1在

7、腎小管上皮細胞、腎間質區(qū)表達增強，與腎間質病理損傷程度呈顯著正相關。
　　2 TSP-1在正常腎間質無表達；隨著腎間質病理損傷程度加重，TSP-1在腎小管上皮細胞、腎間質區(qū)表達增強，與腎間質病理損傷程度呈顯著正相關。在腺嘌呤制備的CRF大鼠動物模型中，TSP-1-TGF-β1軸是導致腎纖維化的重要原因之一。
　　3腎間質VEGF在正常腎組織的腎小管上皮細胞、足細胞表達，隨著腎間質病理損傷程度加重，表達減弱，與腎間質病理損傷程