替普瑞酮大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型HSF1表達的影響.pdf

1、目的:通過向大鼠玻璃體腔注射N-甲基-D-天冬氨酸（N-Methyl-D-aspartic acid，NMDA）制作視網(wǎng)膜興奮性損傷模型，觀察替普瑞酮(geranylgeranylacetone，GGA)對熱休克轉錄因子1(heatshock transcription factor1，HSF1)表達的影響，從而進一步明確GGA誘導熱休克蛋白70(heat shock protein70，HSP70)表達的機制。
　　方法:將48

2、只健康清潔級Wistar大鼠隨機平均分為4組:分別為正常對照組、實驗對照A組、實驗對照B組以及實驗組。正常對照組不行任何處理;實驗組腹腔內注射GGA(800mg/Kg)，實驗對照A組、實驗對照B組腹腔注射等量溶劑(10％DMSO)。腹腔注射后1h實驗對照B組和實驗組的每只大鼠隨機抽取一只眼，將2μ l NMDA(80mmol/L)注入玻璃體腔內，做好標記;實驗對照A組隨機取一只眼行玻璃體腔穿刺并注射等量PBS。實驗組及實驗對照組于玻璃體

3、腔穿刺后2h處死大鼠，正常對照組于實驗開始后1h全部處死。HE染色觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學變化，采用RT-PCR分析視網(wǎng)膜中HSF1mRNA的表達，免疫組織化學染色方法檢測P-HSF1-Ser326蛋白的表達。
　　結果:HE染色顯示:正常對照組大鼠視網(wǎng)膜組織層次完整清晰，細胞形態(tài)規(guī)則，染色均勻;實驗對照A組與正常組相比，視網(wǎng)膜組織結構、神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目及形態(tài)無明顯差別;實驗對照B組大鼠較正常組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層水腫，視神經(jīng)節(jié)細胞胞漿內出

4、現(xiàn)空泡樣變性，內核層、外核層排列疏松，但視神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目及視網(wǎng)膜厚度未見明顯變化;實驗組大鼠視網(wǎng)膜損傷較實驗對照B組明顯減輕。RT-PCR結果顯示:實驗對照A組較正常對照組大鼠視網(wǎng)膜中HSF1mRNA的表達無明顯差別;實驗對照B組HSF1mRNA的表達量較前兩組明顯增加;實驗組較正常對照組mRNA表達量增加，較實驗對照B組無明顯差別。免疫組織化學染色顯示:正常對照組及實驗對照A組視神經(jīng)節(jié)細胞層、內核層及光感受器細胞層的內節(jié)只見微量的棕黃