谷氨酰胺在大鼠視網膜興奮性損傷中對HSP70的誘導表達.pdf

1、目的:在NMDA所致大鼠視網膜興奮損傷模型中,檢測谷氨酰胺誘導HSP70的表達及隨時間的變化。
　　 方法:健康清潔型Wistar大鼠70只隨機分為三組,正常對照組10只,空白對照組10只、實驗組即谷氨酰胺腹腔注射組50只。正常對照組不做任何處理,空白對照組和實驗組中所有大鼠均隨機取大鼠一只眼球玻璃體腔注射2μl80mmol/lNMDA制作視網膜興奮性損傷模型,實驗組在大鼠視網膜損傷興奮性損傷模型制作2天后分別腹腔注射谷氨酰胺(

2、0.75g/Kg),并于注射后1h,4h,8h,12h,24h各隨機處死10只大鼠,其中1h時同時將空白對照組及正常對照組所有大鼠處死。HE染色光鏡下觀察各組視網膜組織的形態(tài)學變化,免疫組織化學染色方法及WesternBlot分析視網膜HSP70表達的變化。
　　 結果:HE染色顯示正常對照組大鼠視網膜組織結構層次清楚,染色均勻,細胞形態(tài)規(guī)則?？瞻讓φ战M與實驗組中不同時間段的大鼠視網膜均顯示視網膜神經節(jié)細胞數目較正常大鼠減少,排

3、列紊亂,神經纖維層與內核層可見萎縮,視網膜整體變薄。WesternBlot分析結果顯示,正常對照組和空白對照組僅有少量HSP70的表達。實驗組注射1h后HSP70的表達開始增強,4h后表達明顯增多,8h達到高峰并持續(xù)到12h,24h表達較前減少,但仍顯著高于對照組。免疫組織化學染色顯示誘導表達的HSP70在視網膜各層細胞均有顯著表達,而正常對照組及空白對照組HSP70僅微量表達于外核層及光感受器內節(jié)。免疫組化染色陽性細胞光密度值測定結果