A型鏈球菌FasA-B-C蛋白的原核表達及其功能的初步研究.pdf

1、A型鏈球菌(Group A Streptococci，GAS)又稱為化膿性鏈球菌，是鏈球菌中致病力最強的菌群，其主要致病物質是外毒素，包括致熱外毒素和溶血素等。鏈球菌的治療目前臨床上多采用聯(lián)合使用抗生素的辦法，但因鏈球菌的抗藥性問題不能解決，因而治療效果不好。 研究表明，fas(fibronectin/fibrinogen binding/haemolytic activity/streptokinaseregulator)操縱

2、子是GAS中的兩元件信號轉導系統(tǒng)，由兩部分組成：二個組氨酸蛋白激酶(FasB，F(xiàn)asC)和一個反應調節(jié)因子(FasA)。在fas操縱子的下游有一個短的非編碼的RNA分子(fas X)，是fas系統(tǒng)調控毒力因子表達的主要效應因子。 本研究選擇了fas操縱子中的三個關鍵蛋白FasB，F(xiàn)asC和FasA為主要研究對象，融合表達了FasB，F(xiàn)asC的胞內區(qū)，利用不同的表達載體表達了FasA和融合蛋白NusA-FasA，制備了FasA的抗

3、體，并嘗試用不同的方法檢測FasB/FasC能否與FasA發(fā)生直接的相互作用。與此同時，根據(jù)文獻報道的．fasX可能的啟動子區(qū)序列，我們設計了特異的引物序列，利用凝膠阻滯的技術方法檢測FasA能否直接調控fasX的啟動子區(qū)。實驗結果顯示，F(xiàn)asB/FasC與FasA并不能直接的相互作用，F(xiàn)asA對于文獻報道的fasX可能的啟動子區(qū)沒有直接的調控作用。我們的工作結果推測在FasB/C和FasA之間可能存在著一種關聯(lián)分子介導磷酸基團的傳遞。