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文檔簡介
1、 趨化因子MIP-2γ是一個屬于CXC家族的新型趨化因子，趨化因子受體屬于七次跨膜的G蛋白耦聯(lián)受體(GPCR)超家族，而GPCR是當前臨床用藥最主要的靶點，所以，本研究想通過不同的策略和技術(shù)路線來克隆CXCL14的受體。為了克隆CXCL14的受體，我們首先嘗試了GSTpull-down的方法，然后嘗試了免疫共沉淀方法，隨后又采用了已發(fā)現(xiàn)的趨化因子受體在克隆時較為常用的一種策略，即通過家族成員在核酸序列上的相似性，用簡并寡核苷酸探針從文
2、庫中釣取或用簡并引物PCR擴增來得到新的基因序列然后再進行實驗驗證所得到的新序列是否是所要尋找的受體序列。接下來又采用了已發(fā)現(xiàn)的趨化因子受體在克隆時最為常用的一種策略——孤兒受體克隆策略(orphanreceptorcloningstrategy)，這些方法均告失敗后，最后我們選用了表達克隆(ExpressionCloning)這一策略，構(gòu)建了CXCL14靶細胞人單核細胞系THP-1的cDNA表達文庫，通過一系列的鑒定表明該cDNA文庫
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