構(gòu)建組織工程尿道的初步研究.pdf

1、該課題擬通過組織工程技術(shù),將體外培養(yǎng)的New Zealand白兔膀胱上皮細(xì)胞種植在Ⅰ型膠原膜支架上,構(gòu)建組織工程尿道后移植到裸鼠體內(nèi),通過形態(tài)學(xué)、免疫組化等實(shí)驗(yàn)方法測試其生物學(xué)特性(上皮細(xì)胞分化、增殖,支架降解),從而探索應(yīng)用組織工程技術(shù)制備尿道替代材料的技術(shù)和方法,為生產(chǎn)臨床可用的尿道替代材料打下基礎(chǔ).主要的結(jié)果和結(jié)論如下:1、在文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上,對移行上皮細(xì)胞分離方法和培養(yǎng)基配方加以改良,改良后的方法能夠快速、大量獲得移行上皮細(xì)胞,

2、同時(shí)細(xì)胞純度高,能穩(wěn)定傳至7-9代.①通過膠原酶消化結(jié)合刀刮法分離膀胱上皮細(xì)胞;以DMEM/F12(1:1)為主,添輔EGF等多種生長因子的培養(yǎng)體系能夠有效獲得移行上皮細(xì)胞;②通過MTT檢測,EGF、bFGF對體外培養(yǎng)的兔膀胱移行上皮細(xì)胞有明顯的促增殖作用,10ng/ml、15u/ml分別是其最佳濃度.2、冷凍干燥法自制的膠原膜,經(jīng)體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí),其與膀胱移行上皮細(xì)胞相容性良好,無毒性;并且體內(nèi)可降解,能誘導(dǎo)宿主血管長入,是組織工程