兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建異種組織工程化尿道修復(fù)兔尿道缺損.pdf

1、研究背景
　　 泌尿生殖系統(tǒng)先天畸形、后天損傷或因其他疾病造成的尿道缺損或狹窄的手術(shù)治療是泌尿外科醫(yī)生努力探索的主題之一，但尿道替代材料的缺乏一直是困擾泌尿外科醫(yī)生最大的難題。組織工程學(xué)的興起為泌尿生殖系統(tǒng)的修復(fù)重建開辟了一個(gè)嶄新的道路。近幾年來(lái)很多學(xué)者在組織工程尿道方面已經(jīng)取得顯著成果。脫細(xì)胞小腸粘膜基質(zhì)，脫細(xì)胞膀胱粘膜基質(zhì)，脫細(xì)胞臍靜脈基質(zhì)，脫細(xì)胞人羊膜基質(zhì)等已被用于尿道重建研究，并已經(jīng)取得一定效果，充分說(shuō)明利用脫細(xì)胞組織基

2、質(zhì)再造尿道有其可行性。同時(shí)隨著人們對(duì)干細(xì)胞基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，應(yīng)用于細(xì)胞修復(fù)組織器官正逐漸成為現(xiàn)實(shí)。目前國(guó)內(nèi)外尚未見到有關(guān)以兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為種子細(xì)胞，脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)為支架材料構(gòu)建組織工程化尿道修復(fù)兔尿道缺損的文獻(xiàn)報(bào)道。
　　 研究目的
　　 探索以兔自身的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為種子細(xì)胞構(gòu)建異種組織工程化尿道修復(fù)兔尿道缺損的可行性。
　　 材料與方法
　　 1.制備脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)，并行組織

3、學(xué)檢查觀察脫細(xì)胞效果。
　　 2.分離兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，鑒定其表型，體外培養(yǎng)增殖后種植于脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)上。
　　 3.60只兔隨機(jī)均分為實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組用種植有自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)修復(fù)約2cm長(zhǎng)兔尿道缺損，對(duì)照組僅用脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)修復(fù)。
　　 4.術(shù)后1，2，4，8，16，24周分別切取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組再造尿道標(biāo)本，行組織學(xué)檢查，比較兩組差異。
　　 5.術(shù)后24周兩組分別行逆

4、行尿道造影及尿動(dòng)力檢查，比較兩組差異。
　　 結(jié)果：
　　 1.所制備脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)大體觀察白色半透明，質(zhì)地柔軟，有一定的彈性及韌性，倒置顯微鏡下觀察呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，鏡下未見細(xì)胞成份。分離培養(yǎng)的細(xì)胞表型為CD45陰性，CD166，CD29，CD105陽(yáng)性，符合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特征。
　　 2.術(shù)后24周再造尿道組織學(xué)檢查結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組尿道腔面光滑，具有和正常尿道類似的組織結(jié)構(gòu)。對(duì)照組血管和平滑肌形成較少，有較多纖維瘢

5、痕，再造尿道腔面不如實(shí)驗(yàn)組光滑。
　　 結(jié)論：
　　 1.以兔自身的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為種子細(xì)胞，脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)為支架，構(gòu)建組織工程化尿道.移植修復(fù)兔尿道缺損，能夠使尿瘺及尿道狹窄發(fā)生的機(jī)率降低，術(shù)后能獲得良好的粘膜覆蓋，可形成類似于正常尿道的組織結(jié)構(gòu)。
　　 2.以骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為種子細(xì)胞，脫細(xì)胞豬尿道基質(zhì)為支架，構(gòu)建組織工程化尿道，材料來(lái)源相對(duì)充足，手術(shù)簡(jiǎn)單，創(chuàng)傷小，是一個(gè)良好的、值得進(jìn)一步研究的、具有臨床