類大麥屬物種高分子量谷蛋白基因的鑒定與分離.pdf

1、、r 7 8 3 5 3 0分英{ 盥Ⅱ3 j n n D 魁址四川農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文類大麥屬物種高分子量谷蛋白基因的鑒定與分離郭志富指導(dǎo)教師t 理直良 夔 握盈豎燕 刮班窺雖基互盟 副班毫且學科專業(yè)；監(jiān)塑亞掛匿狴研究方向t 塵基垃王生塑堂皇直盤2 0 0 5 年6 月K x 基因全長編碼區(qū)長度為2 0 4 6 b p ，由其推導(dǎo)的氨基酸序列含6 8 2 個氨基酸殘基，具有x 型H M W - O S 的典型特征，包括2 1 個氨基酸

2、殘基組成的信號肽，8 6 個氮基酸殘基組成的N - 端保守區(qū)，5 3 3 個氨基酸殘基組成的重復(fù)區(qū)，4 2 個氨基酸殘基組成的C 一端保守區(qū)。N 和C ．端保守區(qū)內(nèi)分別含3 個和1 個半胱氨酸( c ) 。重復(fù)區(qū)內(nèi)，含有9 個三肽( G Q Q ) 、5 6 個六肽( P C , Q 6 Q Q ) 、1 6 個九肽( G Y Y P T S L Q Q ) ，以及位于重復(fù)區(qū)起始端的十二肽( R Y Y P S V T S S Q Q

3、A ) 和十一肽( S Y Y P G Q A S P Q R ) 和重復(fù)區(qū)末端的三肽( G Y D ) 。與其它亞基序列進行比較發(fā)現(xiàn)它與己知高分子量谷蛋白亞基問的主要差異在重復(fù)區(qū)內(nèi)，且集中表現(xiàn)為可重復(fù)短肽類型和數(shù)目的增加或減少，以及可重復(fù)單元內(nèi)個別座位的氨基酸的替換和少量部位的缺失。目前，在己知X 型高分子量谷蛋白噩基中，K x 的長度是最短的。K y 亞基的全長序列長度為1 7 2 5 b p ，由其推導(dǎo)的氨基酸序列同樣具有Y 型高

4、分子量谷蛋白序列的典型特征。但在核苷酸序列中的1 5 5 8 位置上存在一個提前終止密碼子，它的存在可能導(dǎo)致K y 編碼基因沉默，從而導(dǎo)致K - y 亞基不能得到表達。這與選擇性提取高分子量谷蛋白的S D S ．P A G E 結(jié)果相一致。3 ．K x 基因的體外表達對K x 基因進行表達分析，發(fā)現(xiàn)K x 基因在細菌中獲得表達。并且表達產(chǎn)物電泳遷移率同種子蛋白中唯一的高分子量谷蛋白亞基相一致。4 ．聚類分析以大麥D ．h o r d e

5、 i n 作為外類群，對來自于類大麥屬K 染色體組的K x 和K y( 未表達) 亞基與小麥屬A 、B 和D 、山羊草屬c 和u 以及黑麥屬R 染色體組編碼的相應(yīng)亞基的N 端氨基酸序列進行聚類分析，結(jié)果顯示K x 可與A x l 亞基聚為平行的內(nèi)部分支，而K y 則與A y 亞基距離最近，這表明類大麥屬的K 染色體組可能同小麥的A 染色體組進化關(guān)系最近。關(guān)鍵詞t 毛節(jié)草( C r i t h o p M sd e l i l e a n