大豆球蛋白基因轉(zhuǎn)化水稻的研究.pdf

1、本研究首次利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將大豆球蛋白基因?qū)肷a(chǎn)栽培品種粳稻9804和秈稻ZX03，并且成功地獲得了表達(dá)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：1.對(duì)12個(gè)水稻生產(chǎn)品種進(jìn)行了成熟胚及花藥的愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化效率的比較，篩選出粳稻品種9804和秈稻品種ZX03兩種培養(yǎng)力比較高的基因型，確定以成熟胚作為誘導(dǎo)愈傷組織的外植體。2.分析了影響轉(zhuǎn)化效率的因素，建立了適合本試驗(yàn)所用品種的一套高效率的組培轉(zhuǎn)化體系。3.將本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的植物雙元表達(dá)載體PGY-13

2、00(含大豆球蛋白基因和潮霉素基因)導(dǎo)入農(nóng)桿菌LBA4404中，并用于轉(zhuǎn)化水稻愈傷組織，共得到抗性植株9804品種86株，ZX03品種18株。將得到的抗性植株進(jìn)行目的基因和潮霉素基因的PCR鑒定，證實(shí)目的基因己整合到水稻基因組中，共篩選到31株含目的基因的9804品種和2株ZX03品種，陽(yáng)性植株率分別為10.1％和3.52％4.對(duì)T1代轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行目的基因——大豆球蛋白基因和潮霉素基因的PCR鑒定，證實(shí)目的基因已整合到水稻基因組中。同