12412.elp特性研究及elp標簽在重組蛋白純化中的應用

1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheResearchonCharacteristicsofELPandtheELPtaggedSystemforProteinPurificationByJunYuanSupervisor：ProfJu’eZhangDepartmentofBiochemistryandMolecularBiol

2、ogyBasicMedicalCollegeApril2014摘要EkP特性研究及ELP標簽在重組蛋白純化中的應用目的研究生：袁君導師：張菊娥教授鄭州大學基礎醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室河南鄭州450001摘要探討類彈性蛋白多肽(ELP)的可逆相變循環(huán)(ITC)特性，以及運用ELP作為標簽對In目的蛋白進行表達純化，觀察ELP融合蛋白的ITC性質(zhì)以及影響其可逆相變溫度的因素，以期獲得ELP在更多蛋白分離純化中的應用。方法1ELP基因

3、及其引物，目的基因In及ELPIn連接引物的合成，并以合成基因為模板進行擴增。2ELP／pGEM—Teasy，ELPIn／pGEMTeasy重組克隆載體的建立，將構建好的載體轉化至大腸桿菌DH50t感受態(tài)中，涂LA固體培養(yǎng)基平板，挑取單克隆至LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，送去測序。3將測序正確的單克隆菌液取少量用于提取質(zhì)粒，進行雙酶切后膠回收目的片段，連接至表達載體pET28b中，構建重組表達載體ELP／pET28b和ELPIn／pET28b，