副粘病毒入侵宿主細胞的機制研究.pdf

1、囊膜病毒與宿主細胞的膜融合是病毒入侵宿主細胞的第一步,這一過程涉及到病毒囊膜表面蛋白質與宿主細胞表面受體蛋白質(或唾液酸)之間的相互作用和構象變化.該論文研究了仙臺病毒和禽副粘病毒-2這兩種副粘病毒入侵宿主細胞過程中病毒囊膜表面相關蛋白質的相互作用.副粘病毒囊膜中與融合功能有關的糖蛋白有兩種,即血凝素神經氨酸酶(HN)和融合糖蛋白(F),其中F蛋白有兩段七肽重復區(qū)域(heptad repeat, HR),分別稱為七肽重復區(qū)域1(HR1)

2、與七肽重復區(qū)域2(HR2).人免疫缺陷病毒(HIV)的研究已經證明,這兩段多肽(HR1、HR2)相互結合形成六螺旋束(或稱發(fā)夾三聚體)結構從而引發(fā)膜融合.該研究通過體外表達HR多肽和體外實驗,經分子篩及圓二色譜實驗證明,仙臺病毒F蛋白的七肽重復區(qū)(HR1-linker-HR2)可形成穩(wěn)定的六螺旋束結構,熱變性溫度為95℃,首次獲得了該聚合體的蛋白結晶,該晶體在pH2.5、0.1M檸檬酸環(huán)境下生成,X-光衍射解析結果確證其形成的結構是典型

3、的六螺旋束(發(fā)夾三聚體)結構.采用病毒合胞體形成抑制實驗研究首次證明,體外表達的禽副粘病毒-2 HR2多肽能特異性地高效抑制病毒與宿主細胞膜的融合,且與禽副粘病毒-1(即新城疫病毒)沒有交叉抑制活性,而體外表達的禽副粘病毒-2 HR1則沒有這種抑制活性;用分子篩結合蛋白電泳及圓二色譜實驗首次證明,禽副粘病毒-2的HR1和HR2可相互結合形成穩(wěn)定的六螺旋束結構,其熱變性溫度大于90℃.采用ExPASy與DNAstar蛋白質結構預測系列軟件