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1、南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文萍鄉(xiāng)紅鯽胰蛋白酶提取純化及酶原前體cDNA克隆、序列分析姓名:花育旗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):水生生物學(xué)指導(dǎo)教師:林剛20100606ABSTRACTAbstractInthisresearch,thetrypsinofCarassiusauratusVarPingxian舒ensiswaspurifiedbygelfiltrationandcharacterized;Pretrypsinogengenewasclon
2、ed,thededucedaminoacidssequenceandpredictedproteinstructurewereanalysedMainresultsareasfollows:1、TheisolationoftrypsinWegotonekindoftrypsinfromCarassiusauratusvatPingxiangnensisbyammoniumsulfateprecipitationdialysisandge
3、lfiltrationthroughCHOMSepharose4B—CLthemolecularweightwasabout24kDabySDS—PAGE2、TheeffectofactivityoftrypsinbypHandtemperatureTheoptimumtemperatureandpHofthetrypsinforhydrolysisofBAEE(Nc【benzoylLarginineethylester)were50C
4、and753、ThefulllengtheDNAsequenceofpre仃ypsinogengeneThefulllengtheDNAsequenceWas866bpwhichclonedfromPingxiangred—transparentcrueiancarp,includinga5’untranslatedregionof21bpanda3’untranslatedregionof107bp4、Deducedaminoacid
5、sequenceanalysisfrompretrypsinogenTheopenreadingframeofCarassiusauratusvatPingxiangnensispretrypsinogengeneencoded246aminoacidresidues‘whichcomposedbyonesignalpeptidewith15aminoacidresiduesandoneactivationpeptidewith8ami
6、noacidresiduesItcontainsthetypicalcharacterstructureofcatalytictriad(His63,Aspl07andSer200)andobligatoryaminoacidofAspl94;6conservedcystinebridgeswerefoundedby12cysteineresidues5、ThesimilarityanalysisofpretrypinogenCaras
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