山藥的染色體制片技術(shù)優(yōu)化與核型分析.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以通過(guò)大田植株、組培苗、室內(nèi)培養(yǎng)塊莖（或零余子）獲取的山藥根尖為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行了適用于山藥核型分析的染色體制片技術(shù)的優(yōu)化，篩選出最優(yōu)的取材、預(yù)處理、解離的方法，并對(duì)河南鐵棍這一知名山藥品種進(jìn)行核型報(bào)道，為山藥的種質(zhì)創(chuàng)新及利用、親緣關(guān)系、育種工程等方面的研究開(kāi)發(fā)打下細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴通過(guò)室內(nèi)基質(zhì)培養(yǎng)山藥塊莖或零余子獲取根尖的方式為最理想，操作簡(jiǎn)便，根尖中含有的中期分裂相多，獲得染色體分散良好的分裂相的幾率

2、也大。其次為通過(guò)組培苗獲取根尖的方式較好。⑵適合核型分析的預(yù)處理試劑為8-羥基喹啉、8-羥基喹啉與秋水仙素的混合液。最好的預(yù)處理方法為2 mmol/L的8-羥基喹啉在4℃下處理2h。⑶酸解加酶解的方式比單用酸解方式解離效果好，獲得的分裂相的染色體都在同一水平面上，染色體清晰，更適合于核型分析。⑷統(tǒng)計(jì)了兩份薯蕷（Dioscorea opposite Thunb.）和兩份參薯(D.alata L.)的染色體數(shù)目。兩份參薯DS31和HN42的

3、染色體數(shù)均為2n=40。兩份薯蕷HNTGH39和LYZ60的染色體數(shù)均為2n=120，進(jìn)一步證實(shí)薯蕷具有不止1個(gè)的染色體數(shù)目，本實(shí)驗(yàn)在薯蕷種質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了2n=120的染色體數(shù)目。⑸對(duì)河南鐵棍山藥進(jìn)行了核型分析，核型公式為2n=96m(6 SAT)+18 sm(4SAT)+4st+2T，其中有5對(duì)染色體有隨體。染色體的絕對(duì)長(zhǎng)度范圍0.688～2.628μm，屬于微小型染色體或小型染色體。相對(duì)長(zhǎng)度范圍為0.869％～3.319％。核型不對(duì)稱(chēng)系