山藥的染色體制片技術優(yōu)化與核型分析.pdf

1、本實驗以通過大田植株、組培苗、室內培養(yǎng)塊莖（或零余子）獲取的山藥根尖為實驗材料，進行了適用于山藥核型分析的染色體制片技術的優(yōu)化，篩選出最優(yōu)的取材、預處理、解離的方法，并對河南鐵棍這一知名山藥品種進行核型報道，為山藥的種質創(chuàng)新及利用、親緣關系、育種工程等方面的研究開發(fā)打下細胞學基礎。
　　本研究主要內容包括：⑴通過室內基質培養(yǎng)山藥塊莖或零余子獲取根尖的方式為最理想，操作簡便，根尖中含有的中期分裂相多，獲得染色體分散良好的分裂相的幾率

2、也大。其次為通過組培苗獲取根尖的方式較好。⑵適合核型分析的預處理試劑為8-羥基喹啉、8-羥基喹啉與秋水仙素的混合液。最好的預處理方法為2 mmol/L的8-羥基喹啉在4℃下處理2h。⑶酸解加酶解的方式比單用酸解方式解離效果好，獲得的分裂相的染色體都在同一水平面上，染色體清晰，更適合于核型分析。⑷統(tǒng)計了兩份薯蕷（Dioscorea opposite Thunb.）和兩份參薯(D.alata L.)的染色體數(shù)目。兩份參薯DS31和HN42的

3、染色體數(shù)均為2n=40。兩份薯蕷HNTGH39和LYZ60的染色體數(shù)均為2n=120，進一步證實薯蕷具有不止1個的染色體數(shù)目，本實驗在薯蕷種質中發(fā)現(xiàn)了2n=120的染色體數(shù)目。⑸對河南鐵棍山藥進行了核型分析，核型公式為2n=96m(6 SAT)+18 sm(4SAT)+4st+2T，其中有5對染色體有隨體。染色體的絕對長度范圍0.688～2.628μm，屬于微小型染色體或小型染色體。相對長度范圍為0.869％～3.319％。核型不對稱系