圍產(chǎn)蒙古牛外周血中性粒細(xì)胞凋亡調(diào)控基因表達(dá)研究.pdf

1、目的:通過探討圍產(chǎn)蒙古牛外周血中性粒細(xì)胞p53，Bax，cyt-c，caspase-3和Bcl-2基因表達(dá)，為揭示和評(píng)價(jià)圍產(chǎn)免疫抑制提供理論依據(jù)。
　　方法:試驗(yàn)選用經(jīng)產(chǎn)蒙古牛（2～3胎次）10頭，同期發(fā)情、配種，從中選取合適受孕牛3頭（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ），于分娩前22，18，14，10，8，6，4和2天(-22d，-18d，-14d，-10d，-8d，-6d，-4d，-2d)，生產(chǎn)當(dāng)天(0d)，產(chǎn)后2，4，6，8，10，14天(2d、

2、4d、6d、8d、10d、14d)頸靜脈采血。采用全自動(dòng)動(dòng)物血液分析儀檢測(cè)外周血主要白細(xì)胞數(shù)量;分離血清，放射免疫法檢測(cè)血清中雌二醇、孕酮及糖皮質(zhì)激素濃度;分離中性粒細(xì)胞，RT-PCR和WesternBlot檢測(cè)中性粒細(xì)胞p53，Bax，cyt-c，caspase-3和Bcl-2基因mRNA與蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:1.外周血白細(xì)胞總數(shù)、PMNs和MC總數(shù)的變化趨勢(shì)是從-22d逐漸升高，-10d升至最高，0d時(shí)顯著下降(P＜0.05

3、)，2d時(shí)迅速升高(P＜0.05)，2～14d維持在正常水平;淋巴細(xì)胞-22～-8d變化不明顯，-8～0d逐漸下降，0d降至最低，2d時(shí)顯著升高(P＜0.05)，2～14d維持在正常水平;嗜酸細(xì)胞-22～-10d逐漸升高，-10d達(dá)到峰值，隨后下降，在-6、-2d有所回升，0d最低，產(chǎn)后逐漸增加。
　　2.各受試牛E2從-22d逐漸升高，-2d升至最高，2d時(shí)顯著下降(P＜0.05)，2～14d維持在基礎(chǔ)濃度;P4濃度從-22d逐

4、漸下降，2d降至最低，2～14d維持在基礎(chǔ)濃度;GC濃度從-22d逐漸升高，0d升至最高，2d時(shí)迅速下降(P＜0.05)，2～14d維持在基礎(chǔ)濃度。ERαmRNA豐度從-22d逐漸升高，-8d升至最高，-8～14d逐漸下降，而ERβ無明顯變化。
　　3.p53，Bax，cyt-c和caspase-3mRNA豐度從-22d逐漸下降，0d降至最低，0～14d逐漸升高;抗凋亡基因Bcl-2mRNA豐度從-22d逐漸上升，0d升至最高，0