兒茶素對6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡及線粒體PT孔開放的影響.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文兒茶素對6OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡及線粒體PT孔開放的影響姓名：金超芳申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：茶學(xué)指導(dǎo)教師：沈生榮2001.5.1中文摘要以神經(jīng)毒素6OHDA誘導(dǎo)PCI2細(xì)胞凋亡長期被用作PD研究模型。由于氧應(yīng)激在PD發(fā)病中起重要作用，本研究旨在探討天然抗氧化劑茶多酚(GTPs)及其主要的兒茶素單體成分如EGCG，ECG，EGC，EC和()C等是否有神經(jīng)保護(hù)作用，從而探討它們是否有作為PD新藥研究及應(yīng)用的前景。

2、本研究利用細(xì)胞生物、生化等技術(shù)研究茶多酚及其單體對6OHDA誘導(dǎo)的多巴胺能細(xì)胞株P(guān)CI2細(xì)胞凋亡的作用，并比較不同單體的作用效果，根據(jù)單體的分子結(jié)構(gòu)及生化特性來探討其作用機(jī)理。f細(xì)胞存活率實(shí)驗表明6OHDA可時間劑量依賴性地?fù)p傷PCI2細(xì)胞；倒置相I差豆鋇鏡觀察表明，PCI2細(xì)胞受損后，細(xì)胞變圓，貼壁狀態(tài)變差：熒光顯微鏡觀察細(xì)胞核染色體變化顯示，正常細(xì)胞核質(zhì)均一呈淺藍(lán)色，而出現(xiàn)凋亡時，細(xì)胞核固縮，染色質(zhì)凝聚，DNA聚集成亮點(diǎn)。有些可觀察

3、到凋亡小體；DNA電泳出現(xiàn)典型的DNA梯狀條帶。在6OHDA處理前提前30min／JⅡ入不同劑量的保護(hù)劑，對6OHDA造成的上述細(xì)胞損傷有不同的作用。流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率結(jié)果表明GTPs，EGCG和ECG表現(xiàn)出劑量依賴的保護(hù)作用，且在0204mM時保護(hù)作用最好：EC和()C保護(hù)作用不明顯；EGC則表現(xiàn)了劑量依賴的輕微損傷作用。熒光及DNA電泳的結(jié)果也表明GTPs，EGCG和ECG保護(hù)效果最好。兒茶素對PCI2細(xì)胞的保護(hù)作用依次為：E

4、CG溯GG珊sI’C()CEGC。對線粒體膨脹及線粒體膜電位的研究發(fā)現(xiàn)，兒茶素對線粒體損傷有不同的調(diào)節(jié)作用，表現(xiàn)為：ECG，EGCG和OTPs對Ca2和H202導(dǎo)致的線粒體通透性改變有抑制其膨脹的作用：而EC，(斗C和EGC卻有促進(jìn)作用。OTPs對ca2誘導(dǎo)的線粒體Ca2釋放隨加入時間不同，表現(xiàn)有抑制和加速釋放的雙重作用：與ca2同時加入，它們可抑制線粒體對Ca2的吸收和線粒體Ca2的釋放；在線粒體吸收ca2達(dá)到最大時加入GTPs，則它