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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究以京海黃雞為試驗(yàn)素材,分別建立了雞血漿、雞蛋和雞排泄物中阿莫西林(AMO)和氨芐西林(AMP)檢測(cè)的高效液相色譜熒光檢測(cè)法(HPLC-FLD),并通過(guò)試驗(yàn)雞分別以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMO和以60.0、120mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMP,每天給藥1次,連續(xù)5d,分別研究了雞血漿、雞蛋和雞排泄物中AMO和AMP的殘留消除規(guī)律,為動(dòng)物源性食品中AMO和AMP殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的制定和養(yǎng)
2、雞業(yè)中科學(xué)合理使用AMO和AMP、開(kāi)發(fā)無(wú)公害禽產(chǎn)品、降低抗生素對(duì)環(huán)境的污染提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
1、研究了阿莫西林和氨芐西林在雞血漿中殘留的HPLC-FLD法及其殘留消除規(guī)律。雞血漿經(jīng)乙腈提取,飽和二氯甲烷萃取,經(jīng)水楊醛在酸性條件下沸水浴衍生后,高效液相色譜熒光檢測(cè)器檢測(cè)。AMO、AMP均在5.0ng·mL-1~5000.0ng·mL-1濃度范圍內(nèi),本方法線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)分別為0.9999、0.9996。
3、當(dāng)AMO、AMP添加水平均為5.0~125.0μg·mL-1時(shí),雞血漿樣品平均回收率均高于74.72%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均低于10.66%。測(cè)定雞血漿樣品中AMO的檢測(cè)限(LOD)為2.0ng·mL-1(S/N=3)、定量限(LOQ)為5.0ng·mL-1(S/N=10),AMP的檢測(cè)限均為1.0ng·mL-1(S/N=3)、定量限均為2.5ng·mL-1(S/N=10)。產(chǎn)蛋雞分別以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d
4、-1劑量?jī)?nèi)服AMO和以60.0、120.0mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMP,每天給藥1次,連續(xù)5d內(nèi)服給藥后,在給藥期間,雞血漿中AMO和AMP殘留量呈上升趨勢(shì),給藥第5d時(shí),血漿中藥物濃度達(dá)到峰值。在停藥第1d時(shí),血漿中藥物濃度急劇下降,AMO在停藥第2d時(shí),血漿中藥物濃度低于檢測(cè)限;AMP在停藥第3d時(shí),低于檢測(cè)限。
2、研究了阿莫西林和氨芐西林在雞蛋中殘留的HPLC-FLD法及其殘留消除規(guī)律。雞蛋經(jīng)乙腈
5、提取,飽和二氯甲烷萃取,經(jīng)水楊醛在酸性條件下沸水浴衍生后,高效液相色譜熒光檢測(cè)器檢測(cè)。AMO、AMP均在5.0ng·mL-1~800.0ng·mL-1濃度范圍內(nèi),本方法線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)分別為0.9998、0.9999。當(dāng)AMO、AMP添加水平均為5.0~125.0ng·g-1時(shí),雞蛋樣品平均回收率均高于78.30%,RSD均低于7.25%。測(cè)定雞蛋樣品中AMO的檢測(cè)限均為1.2ng·g-1(S/N=3)、定量限均為3.9ng·g-
6、1(S/N=10),AMP的檢測(cè)限均為0.5ng·g-1(S/N=3)、定量限均為1.2ng·g-1(S/N=10)。產(chǎn)蛋雞分別以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMO和以60.0、120.0mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMP,每天給藥1次,連續(xù)5d內(nèi)服給藥后,蛋清、蛋黃和全蛋中AMO和AMP殘留量呈上升趨勢(shì)。休藥第1d時(shí),蛋清中AMO和AMP殘留量均達(dá)到峰值,而蛋黃在休藥第2d時(shí)達(dá)到峰值。休藥前期
7、蛋清、蛋黃及全蛋中AMO和AMP殘留消除較快,后期消除緩慢。休藥11d時(shí),全蛋中AMO和AMP殘留量均低于檢測(cè)限;參考日本《肯定列表制度》關(guān)于阿莫西林在雞蛋中的最高殘留限量(MRLs)標(biāo)準(zhǔn)(10μg·kg-1),建議產(chǎn)蛋雞以25.0mg·kg-1·b.w.d和50mg·kg-1·b.w.d的劑量連續(xù)5d,每天1次內(nèi)服AMO時(shí),其休藥期(WDT)均為5d;建議產(chǎn)蛋雞以60.0mg·kg-1·b.w.d和120.0mg·kg-1·b.w.d
8、的劑量連續(xù)5d,每天1次內(nèi)服AMP時(shí),其WDT為6d和7d。
3、研究了阿莫西林和氨芐西林在雞排泄物中殘留的HPLC-FLD法及其殘留消除規(guī)律。雞排泄物經(jīng)乙腈提取,飽和二氯甲烷萃取,經(jīng)水楊醛在酸性條件下沸水浴衍生后,高效液相色譜熒光檢測(cè)器檢測(cè)。AMO、AMP均在0.1~250.0μg·mL-1濃度范圍內(nèi),本方法線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)分別為0.9998、0.9998。當(dāng)AMO、AMP添加水平均為5.0~125.0μg·g-1
9、時(shí),雞排泄物樣品平均回收率均高于74.72%,RSD均低于10.60%。測(cè)定雞排泄物樣品中AMO的檢測(cè)限為3.0ng·g-1(S/N=3)、定量限為6.0ng·g-1(S/N=10),AMP的檢測(cè)限為1.2ng·g-1(S/N=3)、定量限為3.5ng·g-1(S/N=10)。產(chǎn)蛋雞分別以25.0、50.0mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMO和以60.0、120.0mg·kg-1·b.w.·d-1劑量?jī)?nèi)服AMP,每天給藥1次,
10、連續(xù)5d內(nèi)服給藥后,在給藥期間,雞排泄物中AMO和AMP殘留量呈上升趨勢(shì)。投藥劑量為25.0mg·kg-1·b.w.·d-1試驗(yàn)組,給藥第5d時(shí),AMO殘留量均達(dá)到峰值,休藥第5d時(shí),其殘留量低于檢測(cè)限。投藥劑量為50.0mg·kg-1·b.w.·d-1試驗(yàn)組,給藥第5d時(shí),AMO殘留量達(dá)到峰值,休藥第5d時(shí),其殘留量低于檢測(cè)限。AMP兩個(gè)試驗(yàn)組在給藥期間均呈上升趨勢(shì),給藥第7d時(shí),AMP殘留量均達(dá)峰值;停藥后均在第7d時(shí),低于檢測(cè)限。
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