脂多糖致小鼠肝損傷時對脂代謝基因轉(zhuǎn)錄水平的影響.pdf

1、為了研究脂多糖(LPS)致肝損傷對脂代謝基因轉(zhuǎn)錄水平的影響，本試驗(yàn)以昆明小鼠為研究對象，經(jīng)腹腔給小鼠注射LPS，從形態(tài)學(xué)、肝功指標(biāo)和炎性信號分子轉(zhuǎn)錄水平角度，判定肝損傷模型的建立，利用熒光定量PCR方法檢測小鼠肝臟、脂肪和肌肉組織脂代謝基因的轉(zhuǎn)錄水平，闡明LPS對機(jī)體脂代謝基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。結(jié)果如下：
　　 小鼠肝損傷模型的建立：隨著LPS劑量的增加和作用時間的延長，肝臟組織病理變化明顯，由僅有部分細(xì)胞核溶解，肝竇輕度充血、少

2、數(shù)肝細(xì)胞濁腫，少量炎性細(xì)胞浸潤，直至肝竇擴(kuò)張，明顯充血、淤血，大量炎性細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞呈現(xiàn)點(diǎn)狀、小片狀壞死；LPS能使血液和肝臟中肝功能指標(biāo)(GOP和GOT)的活性升高，上調(diào)肝臟炎性信號分子轉(zhuǎn)錄水平。提示成功建立了LPS誘導(dǎo)的肝臟損傷模型，LPS的使用劑量為3mg/kg，作用時間為6-9h。
　　 肝臟中脂代謝關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水平：時間效應(yīng)試驗(yàn)中，LPS可顯著下調(diào)SREBP、ACCmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，隨作用時間的延長而顯著下調(diào)；12

3、-24h可顯著下調(diào)CD36、SCDmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，3-6h顯著下調(diào)PPARαmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，6-9h顯著上調(diào)了LXRβmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，對LXRα和FASmRNA的轉(zhuǎn)錄水平影響不大；劑量效應(yīng)試驗(yàn)中，LPS可顯著下調(diào)PPARα、LXRα、SREBP、ACCmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，對LXRβ、CD36、FAS、SCDmRNA轉(zhuǎn)錄水平影響不大。提示LPS通過下調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子PPARα、LXRα、SREBPmRNA的轉(zhuǎn)錄，降低ACCmRNA

4、的轉(zhuǎn)錄水平，使肝臟合成脂肪酸的能力下降。
　　 脂肪組織中脂代謝關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水平：時間效應(yīng)試驗(yàn)中，LPS能下調(diào)脂肪組織中PPARα、SREBP、FAS、ACCmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，對LXRα、CD36mRNA的轉(zhuǎn)錄影響不大，但能上調(diào)白色脂肪中LXRβmRNA的轉(zhuǎn)錄，下調(diào)褐色脂肪中SCDmRNA的轉(zhuǎn)錄，對白色脂肪中SCDmRNA和褐色脂肪中LXRβmRNA的轉(zhuǎn)錄影響不大：劑量效應(yīng)試驗(yàn)中，LPS下調(diào)脂肪組織中LXRα、SREBPmRN

5、A的轉(zhuǎn)錄水平，對LXRβ、FAS、ACCmRNA的轉(zhuǎn)錄影響不大，能下調(diào)白色脂肪中CD36、SCD、ACCmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，下調(diào)褐色脂肪中PPARαmRNA的轉(zhuǎn)錄，對褐色脂肪中ACC、SCD、CD36mRNA和白色脂肪中PPARαmRNA的轉(zhuǎn)錄影響不大，且調(diào)節(jié)幅度不依賴于LPS作用時間和劑量。
　　 肌肉組織中脂代謝關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水平：時間效應(yīng)試驗(yàn)中，LPS可上調(diào)SCD、PPARα、LXRα、LXRβ、FAS、ACC、CD36mR

6、NA的轉(zhuǎn)錄水平，對SREBPmRNA的轉(zhuǎn)錄影響不大；劑量效應(yīng)試驗(yàn)中，LPS上調(diào)PPARα、SCD、FAS、ACCmRNA的轉(zhuǎn)錄水平，下調(diào)LXRα、LXRβ、CD36mRNA的轉(zhuǎn)錄，對SREBPmRNA的轉(zhuǎn)錄影響不大，調(diào)節(jié)幅度不依賴于LPS作用時間和劑量。
　　 綜合以上結(jié)果，LPS通過上調(diào)炎性信號分子的轉(zhuǎn)錄水平誘導(dǎo)小鼠肝臟損傷，損傷程度依賴于LPS的劑量和作用時間；LPS通過下調(diào)PPARα、LXRα、SREBPmRNA的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)