芽孢桿菌BL-21和HNDF2混合發(fā)酵抗菌能力增強機理的初步研究.pdf

1、側(cè)孢芽孢桿菌BL-21和枯草芽孢桿菌HNDF2是對大豆根腐病有生防作用的生防菌株。本文對混菌發(fā)酵液的抑菌效果進行研究，比較了BL-21和HNDF2單發(fā)酵與1∶1混合發(fā)酵液對大豆根腐病病原菌尖孢鐮刀菌抑菌能力的強弱。然后，對比分析了單菌與混菌發(fā)酵液活性代謝產(chǎn)物的理化特性，通過薄層層析和非變性PAGE電泳對單菌和混菌發(fā)酵液中的抗菌物質(zhì)進行分離與分析。通過生測法研究了在混菌發(fā)酵中HNDF2及其代謝產(chǎn)物對BL-21產(chǎn)抗菌物質(zhì)的影響及其他細菌對B

2、L-21和HNDF2菌產(chǎn)抗菌物質(zhì)的影響。初步分析了芽孢桿菌BL-21和HNDF2混菌發(fā)酵抗菌能力增強的機理。
　　混菌發(fā)酵抗菌效果研究結(jié)果表明:混合發(fā)酵液對尖孢鐮刀菌的抑菌圈直徑達21.67±0.44mm，BL-21發(fā)酵液抑菌圈直徑達17.67±0.44mm，HNDF2發(fā)酵液抑菌圈直徑達9.83±0.56mm。經(jīng)過顯著性分析，混菌發(fā)酵的抑菌活性顯著高于兩菌單獨發(fā)酵的抑菌活性。
　　混菌發(fā)酵液抗菌活性代謝產(chǎn)物理化特性分析結(jié)果表

3、明，混菌發(fā)酵液在pH5～9范圍內(nèi)活性最好，在60～90℃溫度范圍內(nèi)短時間內(nèi)(20 min)具有較好的熱穩(wěn)定性，對蛋白酶穩(wěn)定，對多種革蘭氏陰性菌、陽性細菌和植物病原真菌具有廣譜的抗菌活性。對混菌發(fā)酵液、BL-21和HNDF2發(fā)酵液的紫外光譜掃描、薄層層析和非變性PAGE電泳對比分析結(jié)果表明在混菌發(fā)酵過程中HNDF2能刺激BL-21產(chǎn)生更多的抗菌物質(zhì)。
　　在混菌發(fā)酵中，通過BL-21和HNDF2菌體形態(tài)觀察及相互間的拮抗作用試驗發(fā)現(xiàn)

4、，兩菌之間有相互拮抗作用，優(yōu)勢菌是BL-21菌。HNDF2及其代謝產(chǎn)物對BL-21產(chǎn)抗菌物質(zhì)的影響的試驗中發(fā)現(xiàn)，在混菌發(fā)酵開始時，加入菌齡為48h的HNDF2菌種子液與BL-21種子液混合發(fā)酵48h，混菌發(fā)酵液的抑菌效果最好。HNDF2發(fā)酵液經(jīng)非變性PAGE電泳分離的分子量為63 kD的條帶(F9)對BL-21抑菌活性增強的刺激作用和HNDF2代謝產(chǎn)物的效果基本相同。
　　其他細菌對BL-21和HNDF2菌產(chǎn)抗菌物質(zhì)的影響的結(jié)果表