組蛋白去乙?;敢种苿┣乓志谹對豬卵巢顆粒細胞增殖和凋亡的影響.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩62頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、顆粒細胞是卵巢中十分重要的體細胞,其在發(fā)育的不同階段合成和分泌激素以及多種生長因子,并通過自分泌或旁分泌途徑發(fā)揮作用。顆粒細胞對卵母細胞成熟、卵泡發(fā)育有至關重要的作用。顆粒細胞的凋亡是導致卵泡閉鎖的很重要的原因。如果一個發(fā)育卵泡中10%以上的顆粒細胞發(fā)生凋亡,則表明該卵泡已經或正在閉鎖。曲古抑菌素A是一種重要的組蛋白去乙?;敢种苿?近年來研究發(fā)現(xiàn),其對多種腫瘤細胞具有抑制作用,作用機理包括誘導腫瘤細胞凋亡、阻滯細胞周期和促進細胞分化等

2、。組蛋白去乙?;敢种苿┳鳛橐环N非常有前景的抗腫瘤藥物,其對機體正常細胞的作用尚待研究。因此,本試驗以TSA為代表藥物,研究組蛋白去乙酰化酶抑制劑對豬卵巢顆粒細胞的作用,并就其機理作初步探討,以為臨床用藥提供一定的參考。具體研究內容如下。
   采用MTT法測定組蛋白去乙?;敢种苿㏕SA對豬卵巢顆粒細胞活性的影響。結果顯示:TSA在低濃度時(10ng/mL以下)對豬卵巢顆粒細胞的生長沒有影響,但隨著藥物濃度的增加,豬卵巢顆粒細

3、胞的生長受到抑制(P<0.05),且這種抑制作用具有劑量依賴性。在10ng/mL和200ng/mL,時,隨著處理時間的延長,在48h時略有升高,而在72h時又降低,但各時間點測定的OD550值差異不顯著(P>0.05),表明TSA對豬卵巢顆粒細胞生長抑制不具有時間依賴性。
   利用間接免疫熒光研究組蛋白去乙?;敢种苿㏕SA對正常豬卵巢顆粒細胞乙酰化水平的影響,并利用熒光定量PCR技術從分子水平對機制做進一步研究。間接免疫熒光

4、結果顯示,200 ng/mL TSA處理的顆粒細胞與對照組比較組蛋白H3乙?;阶兓@著,而在低濃度下(10 ng/mL)變化不顯著。熒光定量PCR結果顯示,200ng/mLTSA處理24h,Hadc-1、Hadc-3和p300 mRNA表達與空白對照組比較差異顯著(P<0.05),在低濃度(10 ng/mL)時,差異不顯著(P>0.05)。表明TSA在較高濃度下影響正常顆粒細胞的乙?;?而在低濃度下對顆粒細胞乙酰化水平不產生影響

5、。
   采用流式細胞儀檢測不同濃度曲古抑菌素A(TSA)作用于顆粒細胞24h后,顆粒細胞凋亡率的變化,以確定凋亡是否為TSA作用后顆粒細胞生長抑制的機制。結果顯示:200ng/m TSA處理組的細胞凋亡率為13.7%,高于空白對照組9.1%,差異顯著(P<0.05);10ng/mL處理組與空白對照相比,凋亡率無明顯差異(P>0.05),表明高濃度TSA促進顆粒細胞活性凋亡,細胞凋亡是顆粒細胞活性的影響方式之一。
  

6、采用流式細胞儀檢測不同濃度曲古抑菌素A(TSA)作用于顆粒細胞24h后,顆粒細胞周期的變化情況,并利用熒光定量RT-PCR技術從分子水平對細胞周期相關基因進行研究。流式細胞術結果顯示:與空白對照組相比,200 ng/mL TSA處理24 h后,G0/G1期細胞百分比有明顯的上升(P<0.05),S期細胞百分比顯著降低(P<0.05),G2/M期細胞百分比差異不顯著。而低濃度(10 ng/mL)處理各期細胞百分比無明顯變化。同樣,熒光定量

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論