2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、羊痘病毒(Capripoxvirus，CPV)能分別引起山羊痘、綿羊痘和牛的結(jié)節(jié)性疹塊病。羊痘(綿羊痘和山羊痘)被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類重大傳染病，我國將其列為一類動(dòng)物疾病。羊痘病毒P32蛋白是CPV具有很好保守性的主要結(jié)構(gòu)蛋白，且含有主要抗原決定簇。 本研究采用PCR技術(shù)擴(kuò)增出CPV P32基因，將其克隆至pMD18-T載體。經(jīng)酶切鑒定、PCR分析證實(shí)獲得了與預(yù)期片段大小一致的P32基因，將其測序分析后與GenBa

2、nk中AF124517株相比較，同源性為98.2﹪，與AY159333株相比較，同源性為99.4﹪。用限制性內(nèi)切酶EcoR I、Not I將P32基因從重組克隆載體pMD18-P32中切下后與相應(yīng)限制性內(nèi)切酶酶切過的畢赤酵母分泌型表達(dá)載體pPIC9K相連接，構(gòu)建了重組表達(dá)載體pPIC9K-P32。將重組表達(dá)載體pPIC9K-P32電轉(zhuǎn)化畢赤酵母菌種GS115，將P32基因亞克隆至pPIC9K，經(jīng)G418抗性梯度篩選，獲得多拷貝重組菌株。

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