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1、三酯酰甘油(Triacylglycerol,TAG)是植物油的主要化學(xué)成分。脂酰輔酶A(Acyl-coenzyme A,Acyl-CoA)和甘油-3-磷酸(Glycerol-3-phosphate,Gly3P)是合成TAG的前體。長鏈脂酰輔酶A合成酶(Long-chain Acyl-CoA synthetase,LACS)可催化種子中脂酰輔酶A的合成。甘油-3-磷酸?;D(zhuǎn)移酶(Glycerol-3-phosphate acyltrans
2、ferase,GPATs)則催化脂酰輔酶A中的脂肪?;鶎Ω视?3-磷酸分子 sn-1位的酯化反應(yīng),形成溶血磷酯酸(Lysophosphatidic acid,LPA),從而啟動TAG的合成。因此,LACS和GPAT是植物種子中TAG合成的關(guān)鍵酶,直接影響種子含油量。模式植物擬南芥同時也是高油分植物,目前對其AtLACS和AtGPAT基因家族的研究較為深入,其中AtLACS9和AtGPAT9基因在種子TAG的合成中可能起重要作用。本論文克
3、隆了這2個基因并將其中AtLACS9基因轉(zhuǎn)化大豆,旨在獲得油分含量提高的轉(zhuǎn)基因大豆。主要研究結(jié)果如下:
?。?)將大豆種子凝集素基因的啟動子(lec)從pBI-lec載體上酶切下來,連接到植物表達(dá)載體pCAMBIA3301(p3301)的多克隆位點上,構(gòu)建成p3301-lec載體。
?。?)用RT-PCR方法克隆了擬南芥AtLACS9基因的編碼區(qū)cDNA,并將其連接到p3300載體的35S啟動子和p3301-lec載體的
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