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文檔簡(jiǎn)介
1、福建省稻瘟病菌菌株81278ZB15含Avr-Pi1、Avr-Pi2、Avr-Pi4a、Avr-Pi4b無毒基因簇,通過圖位克隆技術(shù)定位在BAC克隆子805L15中,但其序列拼接不完整,仍有2個(gè)gap沒有填補(bǔ)。
本研究利用生物信息學(xué)軟件分析805L15序列,共預(yù)測(cè)到48個(gè)基因,其中包含8個(gè)胞外分泌蛋白和1個(gè)GPI信號(hào)錨定蛋白。利用酵母同源重組技術(shù)構(gòu)建了第1、8、16、23、32、37、43號(hào)基因的過量表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)入Guy
2、11菌株的原生質(zhì)體獲得基因OE轉(zhuǎn)化子;同時(shí)利用同源基因替換策略構(gòu)建了第23號(hào)基因的敲除突變體。將這些稻瘟病菌突變體分別噴霧接種C101LACPi-1(t)、C101A51Pi-2(t)、C104PKTPi-3(t)、C101PKTPi-4a、C105TTP-4L-23Pi-4b、CO39近等基因系水稻品,結(jié)果表明,其毒性與野生型菌株Guy11一致,說明這些基因中并不含有無毒基因Avr-Pi1、Avr-Pi2、Avr-Pi4a。但是,對(duì)突
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