稻瘟病菌FJ81278中11個預測特異基因的功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了克隆稻瘟病菌菌株FJ81278中的無毒基因Avr-Pi1、Avr-Pi2、Avr-Pi4a,通過圖位克隆技術將其定位在BAC克隆子805L15中,BAC克隆測序后,預測了該段序列可能編碼的基因,通過與測序菌株70-15基因組序列比較,獲得一些FJ81278菌株中的特異基因。本研究對其中的4個特異基因進行了功能分析。同時,分析了FJ81278菌株的基因組序列,對其中7個預測為信號肽的特異基因進行了功能研究。
　　 構建了上述1

2、1個特異基因,即MoUng01、MoUng02、MoUng03、MoUng04、MoUng05、MoUng06、MoUng07、MoUng08、MoUng09、MoUng10、MoUng11的過量表達載體,然后轉入稻瘟病菌野生型菌株GUY11的原生質體獲得這些特異基因過量表達轉化子。將這些轉化子通過分生孢子懸浮液活體噴霧接種C039近等基因系水稻品種,分別是C101LAC Pi-1(t)、C101A51 Pi-2(t)、C104PKTP

3、i-3(t)、C101PKT’Pi-4a和C105TTP-4L-23 Pi-4b。由實驗結果得知,稻瘟病菌過量表達轉化子與野生型菌株GUY11的致病性是一致的,推測無毒基因Avr-Pi1、Avr-Pi2和Avr-Pi4a不存在于這些特異基因中,或者這些特異基因含有這三個無毒基因但不能正常表達。對這些稻瘟病菌突變體其他表型的分析結果卻顯示,MoUng05、MoUng03、MoUng07的過量表達(OE)轉化子產孢量上升,而MoUng04、

4、MoUng06卻反之；特異基因MoUngol、MoUng09的過量表達轉化子對洋蔥表皮侵染能力有所下降而對水稻的致病力沒有發(fā)生改變。
　　 多個分子標記將無毒基因.Avr-Pi-1、Avr-Pi2和Avr-Pi4a定位于BAC克隆805L15中。但本實驗的結果表明,來源于該BAC克隆的4個特異性基因并非是這三個無毒基因。實驗室前期采用同樣的方法,排除了該BAC克隆中其它預測基因作為這些無毒基因的可能。我們分析造成這個結果的因為可

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