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1、DNA胞嘧啶甲基化是一種重要的表觀遺傳修飾方式,廣泛存在于多種生物中,在高等植物中,核基因組的胞嘧啶殘基是被廣泛甲基化的。大量實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,胞嘧啶甲基化在調(diào)控基因表達(dá)、維持基因組的穩(wěn)定性等方面發(fā)揮重要的生物學(xué)作用。在植物中,胞嘧啶甲基化模式在代與代之間可以穩(wěn)定的遺傳。
許多研究發(fā)現(xiàn),如果DNA甲基化模式發(fā)生變異,可能會(huì)導(dǎo)致生物功能和表型的異常,這也為生物的進(jìn)化提供了機(jī)遇。另一方面,在動(dòng)物和植物中,具體的甲基化模式的遺傳,以
2、及由生物因素和非生物因素引起的甲基化模式變異都對(duì)我們深入研究DNA甲基化的生物學(xué)功能具有重要意義。
對(duì)從頭甲基化作用機(jī)制的了解將會(huì)讓我們更深入的認(rèn)識(shí)基因組甲基化的生物學(xué)功能,因此,非常有必要去認(rèn)識(shí)和分析所有表達(dá)的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶。
本文中,我們將預(yù)測(cè)編碼水稻中甲基轉(zhuǎn)移酶基因的片段,克隆到pET-28a質(zhì)粒中,用IPTG誘導(dǎo)其在大腸桿菌菌株BL21(DE3)中大量表達(dá),純化目標(biāo)蛋白,并在體外不同的條件下對(duì)其功能
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